用抑制差减杂交法分离和克隆梭梭幼苗受渗透胁迫诱导相关基因的cDNA片段

被引：26

作者：

郭新红

姜孝成

潘晓玲

戴玉池

姜维明

陈良碧

机构：

[1] 湖南师范大学生命科学学院,湖南师范大学生命科学学院,新疆大学干旱生态环境研究所,湖南师范大学生命科学学院,湖南师范大学生命科学学院,湖南师范大学生命科学学院长沙,长沙,乌鲁木齐,长沙,长沙,长沙

来源：

植物生理学报 | 2001年 / 05期

关键词：

抑制差减杂交; 梭梭幼苗; 渗透胁迫; cDNA文库; 特异表达;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q945.78 [协迫生理学];

学科分类号：

0903 ;

摘要：

以Hoagland溶液培养的梭梭幼苗 (H)为对照群体 ,甘露醇处理的梭梭幼苗 (M )为目标群体 ,进行抑制差减杂交。用经过HcDNA差减的McDNA构建了一个含有大约 4 0 0个独立克隆的差减文库 ;采用差减前的HcDNA和McDNA以及正向 /反向差减杂交后的cDNA为模板标记探针 ,对随机挑取的 10 0个重组质粒进行差示筛选 ,获得了 2 1个阳性候选克隆。从这些阳性候选克隆中随机挑取了 8个进行Northernblot分析 ,证实其中 3个候选克隆代表了在M中特异表达或表达增强的基因 ,序列分析和同源性比较表明它们与逆境胁迫有关 ;而另外 5个候选克隆无Northern杂交信号 ,推测它们为低丰度转录本

引用

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