TaqMan荧光PCR技术在霍乱弧菌毒力基因检测中的应用

目的利用快速灵敏的TaqMan实时荧光定量PCR方法检测分离到的81株霍乱弧菌的毒力基因。方法根据霍乱弧菌毒力基因ctxAB和zot分别设计特异性引物和探针,在对2组引物和探针进行灵敏度、特异性和重复性评价的基础上对分离到的菌株进行毒力基因的检测。结果81株霍乱弧菌中,有20株菌(24.7%)产CT毒素,来自于外环境的有19株;25株菌(30.9%)携带zot毒素基因;5株菌(6.2%)CT阴性而zot毒素基因阳性。使用这两套系统检测其他肠道致病菌无交叉反应,检测限可达到2～20cfu/ml。结论本研究所采用的TaqMan荧光定量PCR检测霍乱弧菌毒力基因灵敏度高,特异性好,为今后霍乱日常监测和疫情应急处理提供快检的平台。