应用噬菌体展示技术筛选HMGB1启动子结合蛋白

被引：8

作者：

丁宁 ^{[1
]}

肖慧 ^{[2
]}

高巨 ^{[3
]}

许立新 ^{[1
]}

佘守章 ^{[1
]}

机构：

[1] 广州市第一人民医院麻醉科和麻醉学实验室

[2] 广州市第一人民医院门诊部

[3] 广州中医药大学第二附属医院麻醉科

来源：

中国病理生理杂志 | 2010年 / 26卷 / 01期

基金：

广东省科技计划;

关键词：

高迁移率族蛋白1; 启动子; 噬菌体展示; 肽库; 基因表达调控;

D O I：

暂无

中图分类号：

R378 [病原细菌];

学科分类号：

100103 [病原生物学];

摘要：

目的:筛选高迁移率族蛋白B1(HMGB1)启动子结合蛋白。方法:应用噬菌体展示技术,以HMGB1启动子DNA作为固相筛选分子,对噬菌体展示环七肽库进行4轮"吸附-洗脱-扩增"生物筛选,从第4轮洗脱物中随机挑选20个单克隆噬菌体扩增后进行ELISA鉴定。对所筛选克隆进行DNA序列测定和生物信息学分析。结果:经过4轮筛选后,对随机选取的20个噬菌体克隆进行鉴定,其中11个可与HMGB1启动子结合。DNA测序后经过同源性搜索,确定了与HMGB1启动子具有结合作用的蛋白,包括激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)等6种已知功能蛋白和2种未知功能蛋白。结论:筛选到HMGB1启动子的结合蛋白,为研究HMGB1基因的转录调控机制奠定基础。

引用

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页数：4

共 10 条

[1]

P38及上游激酶MKK6对周期性牵张应变诱导的肺泡巨噬细胞高迁移率族蛋白B1表达的调控.[J].丁宁;肖慧;高巨;许立新;佘守章;.生理学报.2009, 01

[2]

内毒素休克小鼠肝脏血管内皮细胞特异性结合肽的体内筛选及初步鉴定 [J].