Northern印迹方法的改良及其应用

被引:3
作者
胡盛平
陈强锋
罗金成
机构
[1] 汕头大学医学院分子生物学中心
[2] 汕头大学医学院分子生物学中心 广东汕头
[3] 广东汕头
基金
广东省自然科学基金; 教育部留学回国人员科研启动基金;
关键词
Northern杂交; RNA琼脂糖凝胶电泳; RNA;
D O I
暂无
中图分类号
R346 [];
学科分类号
1001 ;
摘要
目的 :简化Northern印迹的操作步骤 ,建立安全无毒的RNA凝胶电泳方法。方法 :RNA经变性处理后在不含任何化学物质的中性琼脂糖凝胶上电泳 ,然后用 0 0 5mol LNaOH溶液转印 3h至转印膜上 ,相继与特异核酸探针杂交 ,检测不同表达丰度的基因 ,放射自显影成像。结果 :凝胶电泳图显示清晰的 2 8S和 1 8SrRNA条带 ;Nothern杂交检测出低丰度表达基因。结论 :改良的Northern印迹法能够达到传统方法有效变性、分离、检测特异基因表达的效果 ,垂直凝胶电泳可检测低至 5ng的RNA。
引用
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