T细胞介导的小鼠免疫性肝纤维化形成过程中细胞因子mRNA表达水平

目的　研究刀豆蛋白A诱导下T细胞介导的小鼠免疫性肝纤维化模型形成过程中细胞因子mRNA表达水平的变化。方法　Balb/c小鼠随机分为正常对照组、模型组。模型组小鼠静脉注射刀豆蛋白A 15mg/kg ,每周 1次 ,共 2 0周 ,正常对照组给予等量生理盐水。于第 1、5、12和 2 0次注射后 2 4h分别处死 8只小鼠 ,取肝脏组织低温保存 ,常规苏木精 伊红染色、果莫里法 (Gomori)纤维染色及冰冻切片CD4+ 、CD8+ T细胞染色。抽提小鼠肝脏组织总RNA ,RT PCR扩增肝组织IL 2、IL 4、IL 10、转化生长因子 (TGF) β1和 β 肌动蛋白 (β actin)的mRNA ,凝胶图像分析系统扫描扩增产物的灰度值 ,以 β actin作为内参照 ,计算细胞因子mRNA的相对表达量。 结果　模型组小鼠苏木精 伊红染色和Gomori染色提示实验中晚期发生肝纤维化 ,冰冻切片免疫组织化学染色提示肝组织内淋巴细胞浸润以CD4+ 细胞为主。IL 2mRNA水平仅在第 1次注射后上升 ,随后迅速降低 ;IL 4、IL 10和TGF β1mRNA表达水平则在模型形成过程中保持较高的表达水平。结论　反复刀豆蛋白A刺激可以诱导T淋巴细胞介导的小鼠免疫性肝纤维化模型的发生 ,IL 4、IL 10和TGF β1等细胞因子mRNA在模型形成过程中持续高水平表达 ,在模型的发病过程中起着重要作用。