红雪茶及其多糖降脂保肝作用的实验研究

目的：红雪茶中提取分离制备多糖类活性成分,并测定其含量,观察红雪茶提取物(Lethariella cladonioides extract,HXC)及红雪茶粗多糖(Lethariella cladonioides polysaccharide, LCP)对大鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)的降脂保肝作用并探讨其可能机制。 方法：第一部分：采用水提醇沉法、蛋白酶除蛋白及透析法提取红雪茶多糖；采用苯酚-硫酸法和3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定红雪茶多糖含量。第二部分：将48只Wistar大鼠随机分为6组：正常组、模型组、红雪茶低剂量组、红雪茶中剂量组、红雪茶高剂量组、东宝甘泰组,除对照组喂基础饲料外,其余各组喂饲高糖高脂饲料,同时分别给予不同剂量的HXC(含生药0.9、2.7、4.5g·kg-1·d-1)以及东宝甘泰(1.2g·kg-1·d-1)进行灌胃给药,连续6周。实验6周后,观察大鼠肝脏病理变化并检测各组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬酸氨基转移酶(AST)、甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和肝组织TC、TG、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的水平。第三部分：将48只清洁级SD雄性大鼠随机分为：正常对照组、模型组、红雪茶多糖低、中、高剂量组、东宝甘泰组,每组各8只。除正常对照组喂基础饲料外,其余各组喂高糖高脂饲料,同时分别给予不同剂量的红雪茶多糖(0.1、0.3、0.5g·kg-1·d-1)以及东宝甘泰(1.2g·kg-1·d-1),持续6周后检测血清与肝组织中的生化指标,并观察大鼠肝脏的病理切片,NAFLD活动度积分(NAS)评估肝组织的病理改变。 结果：第一部分：测得红雪茶粗多糖(LCP)中多糖含量为82.6%(相当于生药中多糖含量8.811%)。第二部分：与模型组相比,HXC可以明显降低肝湿质量与肝指数,显著降低血清中的ALT、AST、TC、TG、LDL-C及肝组织中的TC、TG,升高血清中的HDL-C,升高肝组织中的SOD及明显降低MDA(P<0.05或P<0.01),脂肪变性和水样变性程度明显减轻。第三部分：LCP中剂量(0.3g·kg-1·d-1)可以明显降低肝湿质量与肝指数(P<0.05),显著降低血清中的总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及肝组织中的TC、TG及丙二醛(MDA)(P<0.01)且降低丙氨酸氨基转移酶(ALT),明显升高肝组织中的超氧化物歧化酶(SOD)(P<0.05)、谷胱甘肽(GSH)(P<0.01),脂肪变性和气球样变程度明显减轻。 结论：1.采用水提醇沉法、蛋白酶除蛋白及透析法从红雪茶中提取红雪茶粗多糖(LCP),经苯酚-硫酸法和DNS法测定LCP中多糖含量,该测定方法快速、稳定、灵敏、重现性好。2.红雪茶提取物对高糖高脂饮食诱发的大鼠NAFLD具有明显的降脂保肝作用,其机制可能与提高机体抗氧化活力并抑制脂质过氧化反应有关。3.红雪茶粗多糖具有明显的降脂降酶保肝作用。红雪茶粗多糖在剂量为0.3g·kg-1·d-1时能显著降低体内血脂和肝内脂肪,降低转氨酶水平,并且明显抑制脂质过氧化、提高机体抗氧化活力及清除体内自由基。