1，8-桉叶油素的安全性评价

1,8-桉叶油素(1,8-Cineole, C10H18O),广泛存在于蓝桉、油樟、迷迭香、鼠尾草等植物挥发油中,在油樟叶挥发油中含量为58.55%。研究表明,1,8-桉叶油素具有解热镇痛、祛痰止咳、抗病毒、抗肿瘤、抗菌等多方面的药理活性,被广泛应用于化工、食品、医药和香料等领域,具有广阔的开发应用前景。目前,国内对于1,8-桉叶油素安全性无系统和深入研究。本研究对1,8-桉叶油素的急性毒性、蓄积性毒性、亚急性经口毒性、亚慢性经口毒性等一般性毒理学和致突变性特殊毒理学进行了研究,为其安全性评价提供了全面、有效的科学依据。主要研究结果如下： 1.1,8-桉叶油素对小鼠的急性毒性试验：1,8-桉叶油素对小鼠的经口半数致死量(median lethaldose,LD50)为3849.03mg/kg,95%可信限为3580.9～4130.5mg/kg。根据WTO的外源性化学物质急性毒性分级标准,1,8-桉叶油素属于低毒物质。 2.1,8-桉叶油素的蓄积性毒性研究：采用固定剂量(1/5LD50)连续经口给予试验小鼠1,8-桉叶油素乳剂28d,以蓄积系数(cumulation coefficient, Kcum)评价其蓄积毒性,测得蓄积系数Kcum大于5,表明1,8-桉叶油素几乎不具有蓄积毒性作用。 3.1,8-桉叶油素对小鼠的亚急性经口毒性试验：在亚急性毒性试验中,分别给予高、中、低(1/5、1/10、1/20LD50)剂量的1,8-桉叶油素-吐温80乳剂30d后,各试验组小鼠的体重、血液生理生化指标和脏器系数与对照组相比均无显著变化(P>0.05)；用药4周后,仅高剂量(1/5LD50,769.8mg/kg)组小鼠的饲料利用率显著下降(P<0.05)。组织病理学检查结果显示：1,8-桉叶油素在(1/10LD50,384.9mg/kg)和(1/20LD50,192.45mg/kg)剂量下对小鼠的心、肝、脾、肺、肾、睾丸、卵巢的显微结构无影响或影响较小,仅表现为个别脏器的轻微组织充血,对细胞无明显病理性损伤；仅高剂量(769.8mg/kg)的1,8-桉叶油素对小鼠肝脏、肾脏和脾脏有不同程度的影响,主要引起肝细胞和肾小管上皮细胞发生颗粒变性和水泡变性,脾小体中出现大量的朗罕氏细胞浸润,该结果表明,1,8-桉叶油素在高剂量(769.8mg/kg)下对小鼠有亚急性毒性反应。 4.1,8-桉叶油素对小鼠的亚慢性经口毒性试验：亚慢性毒性试验中,分别给予小鼠高、中、低(1/20、1/60、1/180LD50)剂量的1,8-桉叶油素-吐温80乳剂90d。试验结束后,中剂量(1/60LD5o,64.15mg/kg)和低剂量(1/180LDso,21.38mg/kg)的1,8-桉叶油素对小鼠的体重、心、肝、脾、肺、肾和生殖器官等脏器系数以及血清酶活性无影响(P>0.05)。高剂量组(192.45mg/kg)组小鼠在灌胃10周后出现体重增长受抑制,中性粒细胞百分比升高,淋巴细胞百分比降低,与对照组相比有显著差异(P<0.05)。血清中白蛋白(albumin, ALB)降低,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)、尿素氮(urea nitrogen,BUN)、肌酐(creatine, CRE)均升高,与对照组相比差异显著(P<0.05)。停药观察30d后,血清生化指标恢复。病理组织学检查结果：高剂量(192.45mg/kg)的1,8-桉叶油素亚慢性中毒主要引起小鼠肝细胞发生颗粒变性和水泡变性,肝中央静脉及肝血窦充血；肾小管上皮细胞发生颗粒变性和水泡变性,肾小管毛细血管充血,部分肾小管管腔中有红色丝状物质渗出。中、低剂量(64.15mg/kg,21.38mg/kg)组小鼠各脏器病理组织学检查无明显病理损伤。超微结构变化表现为：肝细胞和肾小管上皮细胞线粒体肿胀、嵴模糊、部分空泡化；内质网扩张、断裂；核染色质浓缩边集,核周间隙增宽。停药30d后,损伤较严重的肝和肾病理变化减轻甚至恢复。上述结果提示：1,8-桉叶油素的观察到损害作用的最低剂量(lowest observed adverse effect level, LOAEL)为192.45mg/kg,未观察到有害作用剂量(NoObserved Adverse Effect Level, NOAEL)即最大无作用剂量为64.15mg/kg,毒作用靶器官为肝脏和肾脏。 5.1,8-桉叶油素对小鼠的致突变性毒性研究：通过骨髓嗜多染红细胞微核试验和精子畸形试验评价了1,8-桉叶油素对小鼠的致突变性作用。试验小鼠给予含1,8-桉叶油素1/5、1/10、1/20LD5o剂量的吐温80乳剂5d后,骨髓嗜多染红细胞的微核率分别为(4.25±0.71)‰,(3.38±0.92)‰,(3.50±0.93)‰与阴性对照组(3.00±0.88)‰相比无显著差异,但明显低于阳性对照组(27.63±3.40)‰(P<0.05)。1,8-桉叶油素1/5、1/10、1/20LD50剂量对雄性小鼠精子畸变率分别为(3.37±0.32)%、(3.30±0.56)%、(3.30±0.38)%,与阴性对照组(2.95±0.41)%相比无显著差异,但明显低于阳性对照组(17.44±2.15)%。试验结果显示,1,8-桉叶油素对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率和精子畸形率的发生无诱变作用。此研究结果表明：1,8-桉叶油素对小鼠无致突变毒性作用。