三黄方抗内毒素活性的药代动力学和药效学研究

三黄方首载于《金匮要略》,由大黄、黄连和黄芩三味中药组成,具有清热燥湿、泻火解毒等功效,临床多用于热毒证治疗。热毒证与内毒素血症临床症状相似,而清热解毒法作为治疗热毒证的主法贯穿于治疗的始末。本文在中医药理论的指导下,遵循病证结合、方证关联、药与证对应、理法方药统一的原则,提出三黄方可以治疗内毒素血症的研究思路。 目的: 本文以抗内毒素活性为切入点,开展三黄方抗内毒素血症的药代动力学和药效学实验研究,并对三黄方制剂体外抗内毒素活性进行比较,以揭示三黄方有效组分与药效的关系,阐明其作用机理,为三黄方制剂临床应用提供科学依据。方法: 1三黄方制剂体外抗内毒素活性及其化学指纹图谱研究 采用动态浊度法,对不同处方的十二个厂家三黄方制剂的体外抗内毒素活性进行比较。并对十二个厂家的三黄方制剂进行化学指纹图谱初步研究,确认其共有色谱峰,采用聚类分析和主成（?）分析法进行数据分析,探讨影响三黄方制剂质量差异的因素。然后,运用多元线性回归、双变量相关分析法和主成分分析法,分析三黄方制剂化学指纹图谱和体外抗内毒素活性的相关性。 2一清胶囊抗内毒素血症的药效学和药代动力学研究 根据前期实验结果并结合中医药理论,本实验选择三黄方制剂体外抗内毒素活性较强的制剂一清胶囊,作为三黄方的药效学和药代动力学研究的受试对象。 以血清中内毒素、一氧化氮的含量、外周血流动力学、组织形态学等为指标,进行一清胶囊对LPS致犬内毒素血症模型的药效学研究。 根据预实验和参考文献,以大黄酸和黄芩苷为药代动力学研究的指标,开展一清胶囊在空白给药组和模型给药组中的药代动力学研究,测定黄芩苷、大黄酸经时血药浓度。采用DAS软件分析黄芩苷、大黄酸的药代动力学参数,采用T检验对空白给药组和模型给药组药代动力学参数进行分析。 在一清胶囊抗内毒素血症的药效学和药代动力学实验的基础上,以血流动力学、清除内毒素率、抑制NO率为效应指标,黄芩苷、大黄酸的血药浓度为药代动力学指标,探讨一清胶囊药代动力学指标和药效学指标的相关性。 结果: 1三黄方制剂体外抗内毒素活性及其化学指纹图谱研究 不同三黄方制剂的化学成分差异较大,黄芩苷、大黄酸、大黄素是影响制剂质量的主要因素。三黄方制剂中小檗碱、黄芩苷、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚等化学成分和体外抗内毒素活性相关性较大。 2一清胶囊抗内毒素血症的药效学和药代动力学研究 一清胶囊能够清除血清内毒素,抑制NO的过度释放,对外周血流动力学参数具有明显的正性作用,还能够改善LPS致Beagle犬内毒素血症脏器组织形态学的病理变化。总之,一清胶囊能够缓解内毒素血症引起的炎症反应。 对空白给药组和模型给药组药代动力学参数进行比较,其中黄芩苷药代动力学参数t1/2ka、ka、MRT（0-∞）,大黄酸药代动力学参数Cmax、Tmax、T1/2、Ka、K都存在显著性差异。模型给药组相对于空白给药组,黄芩苷和大黄酸的吸收、代谢速率明显减慢。 血药浓度-效应曲线均呈现出逆时针滞后环,效应的峰值滞后于血药浓度峰值,效应室不在血液室,出现效应滞后于血药浓度的现象。 结论: 本实验综合采用药效学、化学指纹图谱、药代动力学等多学科研究模式,证明了三黄方能够减轻内毒素引起的炎症反应;黄芩苷、大黄素、大黄酚、大黄酸、大黄素甲醚等是三黄方抗内毒素活性的主要有效组分,其中药理效应明显滞后于血药浓度。 创新点: 1提出了三黄方能够抗内毒素血症的研究思路,这为三黄方治疗内毒素血症提供了科学依据。 2建立化学指纹图谱-药效学（体内和体外）-药代动力学结合的方法评价三黄方质量和药效。