健脾消脂方对2型糖尿病血脂异常大鼠MCP-1、NF-КB的影响研究

目的:本课题主要观察健脾消脂方对2型糖尿病血脂异常大鼠体重、血糖、血脂、血清胰岛素及肝脏组织中MCP-1、NF-КB表达水平的影响研究。探讨健脾消脂方防治2型糖尿病血脂异常的作用机制,从而为临床用药提供科学依据。方法:本实验建立2型糖尿病血脂异常大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型对照组、健脾消脂组、辛伐他汀组、健脾他汀组。进行血糖、FINS、血脂及胰岛素抵抗相关指标的检测,采用免疫组化技术从蛋白水平观察肝脏MCP-1、NF-КB的表达情况。并采用实时荧光定量PCR技术,从分子水平观察肝脏组织中MCP-1表达的情况。结果:1.健脾消脂方可降低模型组大鼠血糖、血脂及FINS水平,与模型对照组相比均有统计学意义(P<0.01),大鼠的饮水量减少,体重降低,与模型对照组比较有统计学意义(P<0.01)。2.模型组大鼠肝脏MCP-1蛋白表达情况:①免疫组化结果显示:空白对照组大鼠的肝脏MCP-1的区域表达有限,强度也较弱。模型对照组大鼠的MCP-1的表达显著增强,健脾消脂组表达较模型对照组弱(P<0.01)。②定量分析结果显示:与空白对照组相比,模型对照组大鼠肝脏组织中MCP-1的平均光密度值显著高于正常组(P<0.01);与模型对照组相比,健脾消脂组大鼠肝脏MCP-1的平均光密度显著低于模型对照组(P<0.01),③大鼠肝脏组织中MCP-1 m RNA表达情况:与空白对照组相比,模型对照组肝脏MCP-1m RNA的基因表达明显高于空白组(P<0.01);与模型对照组相比,健脾消脂方组肝脏MCP-1m RNA基因表达显著低于模型对照组(P<0.05)。3.T2DM大鼠肝脏中NF-КB蛋白表达情况:①免疫组化结果显示:与空白对照组相比,模型对照组大鼠肝脏中NF-КB的阳性着色加重,表达增强,与模型对照组相比,健脾消脂方的NF-КB的蛋白表达较模型组弱,健脾消脂方可以降低NF-КB的蛋白表达。②半定量评分显示:模型组弥漫性强染色,健脾消脂组、健脾他汀组、辛伐他汀组呈局部弱染,显著低于模型组。结论:1、健脾消脂方具有降糖、降脂、减轻大鼠体重、降低FINS水平、降低炎症因子水平的作用。2、模型对照组大鼠肝脏中MCP-1蛋白及基因表达水平提高,提示MCP-1可能是2型糖尿病血脂异常肝脏炎症的重要炎症因子;健脾消脂方可以降低模对照型组大鼠肝脏MCP-1蛋白及基因表达水平,MCP-1是健脾消脂方的作用靶点。3、模型对照组大鼠肝脏中NF-КB蛋白表达明显增高,证明了NF-КB也是T2DM血脂异常大鼠肝脏炎症的炎症因子之一;健脾消脂方能够降低大鼠肝脏中NF-КB蛋白的表达,NF-КB可能也是该中药复方的另一个作用靶点。