人参(Panax ginseng C.A.Meyer.)是宝贵中药,含有大量的活性成分,包括人参皂苷、人参多肽和人参多糖等等。人参多糖具有良好的免疫调节、抗肿瘤、抗氧化和降血糖等多种生物活性。但1966年Solov 'eva和Ovodov第一次报道人参多糖以来,人参多糖的结构研究主要集中在人参酸性糖——果胶部分,而对中性人参多糖——淀粉样多糖的分级和结构研究较少,影响了中性多糖的开发与应用。针对以上问题,本论文研究了中性人参多糖的分离纯化和结构分析,系统比较了不同浓度醇沉对中性人参多糖分级的影响,并对50%乙醇沉淀得到的人参多糖级分进行了精细结构分析。
将人参根中提出粗多糖经Sevage法脱蛋白、醇沉、常规干燥得到人参根总糖WGP,再经DEAE-Cellulose离子交换柱层析分离得到酸性多糖级分WGPA和中性多糖级分WGPN。苯酚-硫酸法检测WGPN总糖含量为96.7%。HPLC法检测WGPN含有95.3%的葡萄糖,痕量的半乳糖和阿拉伯糖。通过酶解、IR(红外光谱)分析和NMR(核磁共振波谱)对WGPN进行结构鉴定,结果显示WGPN为以α-1,4-Glcp为主链,并存在α-1,4,6-Glcp的分支的吡喃型葡聚糖。
用不同浓度乙醇将WGPN进一步分级,并检测不同浓度醇沉沉淀的淀粉含量、单糖组成和分子量。结果表明,分级所得沉淀的淀粉含量和分子量随分级乙醇浓度的升高而逐渐下降,当醇浓度达到60%时,基本能将人参水提物中的多糖和寡糖分离,大分子量多糖由葡萄糖构成,小分子量多糖和寡糖由葡萄糖、阿拉伯糖和半乳糖构成。各个级分经高碘酸氧化、Smith降解和NMR分析,推断出WGPN应是多种淀粉类似机构组成的多糖混合物。
WGPN的50%乙醇分级沉淀部分WGPN-50%-EP的经部分酸水解后制备糖样WGPN-50%-AH, NMR分析,推断出WGPN-50%-AH有5种同分异构体,是中性人参多糖的的重要组成单元。