大孔树脂对中药多糖的分离纯化

中药现代化的关键技术之一是有效成分的提取分离与精制,由于大孔树脂本身性质具有选择性吸附的特点并以其简单高效的工艺、低廉的成本在天然药物有效成分分离中有着广泛的应用。但一般大孔树脂对多糖类天然产物的纯化时没有较理想的解决方案。本实验将以甘草多糖为例,应用数种大孔树脂对其进行纯化,考察脱色脱蛋白效果,研究大孔树脂在多糖纯化中的应用。 确立了多糖溶液的分析方法,选用苯酚-硫酸比色法测定多糖含量,选用Bradford法测定溶液中蛋白质的含量,并对上述方法的重复性及加样回收率进行了研究,发现其标准曲线线性关系良好,标准偏差和变异系数满足实验的要求。并确立了用分光光度计测定溶液420nm的吸光度,以表示色素的含量。 应用多种商品化的大孔树脂,对甘草多糖的纯化进行了研究,研究了多种树脂的静态吸附性能,以及吸附树脂和透析处理粗多糖对多糖纯度的影响,发现经过D301T和S-8的处理,纯化后多糖的蛋白、色素含量显著降低,透析后多糖纯度可达到80%以上。 纤维素微球经活化、胺化制备成树脂,并对其吸附性能和对多糖的纯化进行了研究。结果表明甘草多糖溶液静态吸附时,低浓度吸附较为有利。经过树脂动态吸附处理后多糖的蛋白、色素含量最多可降低75%和55%,多糖纯度提高约为4%,蛋白、色素清除效果明显,但对多糖纯度提高较小,处理量较少。 聚乙烯醇微球经活化、胺化制备成树脂,并对其吸附性能和对多糖的纯化进行了研究。结果表明最佳吸附条件为10mg/ml甘草多糖,流速12BV/h,上样量约为2BV(BV为树脂体积数),处理量明显高于纤维素树脂,处理量为第1BV时,蛋白含量为0.24%,多糖颜色呈现类白色,多糖纯度提高30%,达到71%。第2BV时,多糖纯度提高10%,达到54%,2BV后对多糖纯度的影响不大。 经过研究发现大孔树脂处理工艺要优于传统的脱色、脱蛋白方法,为中药多糖的分离纯化提供了有效的解决方案。