人参多糖降糖机制的初探

目的 建立3T3-L1脂肪细胞模型,观察人参多糖对体外培养的3T3-L1前脂肪细胞增殖和成熟脂肪细胞凋亡的作用,以及对脂肪代谢和葡萄糖转运子4(GLUT4)易位的影响,为探讨人参多糖的降糖机制提供实验依据。 方法 在特殊诱导剂的作用下,以形态学观察结合油红O染色为标准,建立3T3-L1脂肪细胞模型;MTT法建立3T3-L1前脂肪细胞“OD570—细胞数目”曲线,观察WGPA和WGPN对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响;Hoechst染色观察WGPA和WGPN对3T3-L1脂肪细胞凋亡的影响;油红O染色检测不同浓度WGPA和WGPN单独作用或与胰岛素协同作用对脂肪代谢的影响;Western-Blot、免疫荧光、流式细胞法检测WGPA、WGPN、WGPA-H、WGPA-2A、WGPA-2N对葡萄糖转运子4易位的影响。 结果在分化诱导激素(胰岛素、1-甲基-3-异丁基次黄嘌呤、地塞米松)的刺激下,3T3-L1前脂肪细胞成功分化为脂肪细胞,油红O染色后镜下观察细胞分化率大于70%。1 mg/ml WGPA和WGPN作用48小时后对3T3-L1前脂肪细胞增殖均有明显的抑制作用(与空白对照比较P<0.05);但对于成熟的脂肪细胞不具有诱导凋亡的作用。 在成熟的3T3-L1脂肪细胞中,WGPA、WGPN都能够明显促进脂肪的积累,并在0.1-1 mg/ml浓度范围内呈现剂量依赖效应。WGPA对胰岛素促脂肪积累的作用有抑制效果,0.5 mg/ml的WGPA能够完全抑制胰岛素的作用。WGPN对胰岛素促脂肪积累的作用没有影响。上述结果提示,人参多糖的降糖作用可能与其调节脂肪代谢有关,WGPA、WGPN调节脂肪代谢途径可能不同。 在正常3T3-L1脂肪细胞中,胰岛素刺激葡萄糖转运子4易位到细胞表面。WGPA-2N、WGPA-2A对胰岛素刺激条件下的葡萄糖转运子4易位没有影响。WGPN、WGPA-2A具有类似胰岛素样的,促进葡萄糖转运子4易位的作用。 结论 WGPA、WGPN抑制体外培养3T3-L1前脂肪细胞增殖,增加细胞内脂质积累,WGPN、WGPA-2A促进葡萄糖转运子4易位的效应与胰岛素类似。人参多糖影响脂肪细胞增殖、脂肪代谢以及葡萄糖转运子4易位的效应,可能是其降血糖的作用机制之一。