背景和目的
脓毒症(sepsis)是感染因素介导的全身性炎症反应综合症,是临床危重病患主要死亡原因之一。最近美国和欧洲的流行病学调查表明,脓毒症的发病率约为病人的2-11%,其中重症脓毒症和脓毒性休克患者的死亡率则高达30-60%以上。临床上尚缺乏针对细菌脓毒症的有效防治措施。
姜黄素是姜黄的有效成分,具有抗氧化、阿默茨病、抗炎、化学预防、化学治疗作用等。研究表明,姜黄素在体外对不同的癌症细胞都有抗癌活性。本实验室前期研究表明,姜黄素对脓毒症模型的小鼠有保护作用。FM0815是本实验室合成的姜黄素衍生物。Brian等人的研究表明,FM0815对无胸腺裸鼠接种的人乳腺癌有一定的抗癌活性且毒性低。本课题观察姜黄素衍生物FM0815对大肠埃希菌感染导致的细菌脓毒症的防治作用,并进一步从细胞分子水平探讨其作用机制。
方法
(1)体外培养小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,ELISA法观察姜黄素衍生物FM0815对LPS诱导RAW264.7细胞释放TNF-α和IL-6的影响;
(2)观察FM0815对脓毒症模型小鼠的保护作用,同时ELISA法测定TNF-α、IL-6和NO的含量;
(3)通过western blotting的方法,观察Hsp 70,NF-κB,P-P38蛋白含量变化。
结果
(1) FM0815显著抑制LPS诱导RAW264.7细胞的TNF-α和IL-6释放,并具有明显的量效关系(P＜0.05或P＜0.01);
(2) 100mg/kg FM0815显著降低大肠埃希菌感染小鼠的死亡率,降低血清中TNF-α和IL-6的含量;
(3) FM0815显著抑制LPS诱导RAW264.7细胞NF-κB核转移作用,及显著下调LPS诱导RAW264.7细胞P-P38蛋白的表达。此外,还可上调Hsp70蛋白的表达。
结论:
建立了相对稳定的小鼠细菌脓毒症模型,FM0815对脓毒症模型小鼠具有保护作用,其保护作用可能与下列因素有关:
(1) FM0815可能通过抑制炎症反应细胞的活化,减轻了TNF-α和IL-6等炎症介质释放导致的全身性炎症反应;
(2) FM0815可能通过阻断LPS活化的NF-κB和MAPK途径,起到保护作用。
(3) FM0815的保护作用还可能和其激活热休克蛋白70有关。
