白术地上部分和浙贝母花的资源利用

白术(Atractylodes macrocephala Koidz.)和浙贝母(Fritillaria thunbergii Miq.)为“磐五味”中的两味中药。白术的传统用药部位为根茎,有健脾益气,燥湿利水,止汗,安胎的功效;浙贝母习用部位为鳞茎,有清热化痰、散结解毒之功。磐安因其独特的地理环境和气候条件,使其所产的这两种药材质量上乘,质地稳定,目前已经形成一定规模的生产基地。但是,在药材的采收中,白术和浙贝母的非传统药用部位(主要是茎叶和花)因为没有开发利用,往往未经处理就丢弃或焚烧了,造成资源白白浪费,并且对环境也造成一定的污染。如能对其进行系统的化学成分与生物活性研究,从中找到活性成分或新用途,开发成标准提取物乃至新药,对于综合开发利用“磐五味”资源,提高产业附加值,构建资源节约型农业具有重大意义。基于以上目的,本次试验以白术地上部分和浙贝母花为材料进行研究,系统的对白术地上部分和浙贝母花进行了化学成分以及生物活性方面的研究,明确了白术地上部分和浙贝母花的主要化学成分类型以及生物活性。本次研究主要包括以下几方面内容: 一、白术地上部分的化学成分及生物活性研究 1、以二甲苯致小鼠耳肿胀模型,对白术地上部分75%乙醇提取物,石油醚、乙酸乙酯、正丁醇提取物和水部位进行抗炎活性跟踪筛选,筛选出乙酸乙酯部位(ACE)为白术中的活性组分群。采用柱层析和制备薄层色谱等方法从白术地上部分的乙酸乙酯部位(ACE)中分离得到25个化合物,从正丁醇部分(BE)分离得到12个化合物。经波谱学分析以及对照品比较的方法,鉴定了其中24个化合物,其中有19个化合物为首次从该种植物中分离得到,所有化合物均为首次从白术地上部分分离得到。 2、采用GC-MS法对白术地上部分和地下根茎石油醚部位成分进行比较分析,分别从地上(BZS)和地下部分(BZ)鉴定出21和31种成分。白术地上部分(BZS)的成分主要为三萜类化合物:羽扇豆醇lupeol (42.18 %)、β-香树脂醇β-amyrin (24.45 %)和oleanen-12-en-3-yl acetate (3.67 %)等,占70 %以上;而地下根茎部分的(BZ)成分中三萜类含量很少,主要含有倍半萜类成分:3,6-dimethyl-5-(prop-1-en-2-yl)-6-vinyl-4,5,6,7-tetrahydrobenzofuran (72.49 %)和Guaia-3,9-diene (7.12 %)。 3、以紫外-可见光的方法测定了白术地上部分各极性部位的总酚酸和总黄酮含量,结果表明乙酸乙酯部位的总酚酸和总黄酮含量均为最高。 4、白术地上部分石油醚(PEE)部位进行体外抗肿瘤活性测定,结果发现PEE有较好的抗白血病肿瘤细胞(CEM)的活性,其IC50在10μg/ml以下;以DPPH自由基清除能力和超氧化阴离子自由基清除能力的模型;对白术地上部分各极性部位以及其中得率较大的单体咖啡酸乙酯的抗氧化能力进行评价。结果表明,乙酸乙酯部位和咖啡酸乙酯有较强的抗氧化能力。 二、贝母花的化学成分及生物活性研究 1、采用柱层析和制备薄层色谱等方法从浙贝母花的乙酸乙酯部位(AEF)中分离得到13个化合物,从正丁醇部位(BE)分离得到7个化合物。经波谱学分析以及对照品比较的方法,鉴定了其中10个化合物,其中8个为首次从该种植物中分离得到。采用GC-MS法对对浙贝母花中乙酸乙酯部分以石油醚-乙酸乙酯(30:1-15:1)洗脱下来的中低极性脂肪油(BMY)进行GC-MS分析,从BMY中鉴定出25种成分,占色谱检出总成分的91.02 %,主要成分为不饱和脂肪酸类:ω-6型的Linoleic acid和ω-3型的(9Z, 12Z, 15Z)-octadeca-9,12,15-trienoic acid(26.55 %)。 2、以小鼠醋酸扭体模型,对浙贝母花75 %乙醇提取物,乙酸乙酯、正丁醇提取物和水部位进行镇痛活性研究,发现乙酸乙酯部位(AEF)和正丁醇(BEF)有较强的镇痛活性。