二氢杨梅素的提取、金属离子配合物的制备及其生理活性的研究

二氢杨梅素(DMY)属于黄酮类化合物,大量存在于葡萄科蛇葡萄属植物中,其具有消炎镇痛、祛痰止咳、保肝护肝、解酒、抗高血压、降血糖、消脂、抗肿瘤、抑菌和抗氧化等许多生理活性。DMY具有超离域度,整个分子形成一个大π键共轭体系,具有强烈的配合作用使其易与金属离子形成配合物。某些微量金属元素本身具有一定的生理活性,若DMY和金属元素形成配合物,有可能产生新的生理活性或增加其疗效。因此,对DMY金属配合物的研究,有助于从新型金属基药物的角度开发利用该类化合物。本文研究了从藤茶叶中提取DMY的最佳工业化工业条件,分别合成了DMY-Zn(Ⅱ)、DMY-Cu(Ⅱ)、DMY-Mn(Ⅱ)配合物,并对其进行了表征,研究了DMY-Mn(Ⅱ)配合物与ctDNA的相互作用。其主要内容如下： 1)以干藤茶叶为原料采用乙醇辅助,水为溶剂提取DMY,研究了乙醇预处理的时间,茶叶干品与乙醇的料液比,加热时间等因素对提取率的影响。通过单因素实验和正交试验,确定了提取的最佳工艺条件。最佳提取工艺条件为：采用乙醇辅助提取DMY,在95%乙醇预浸泡12h,干品与乙醇料液比为1：10,加热时间30min时DMY的提取率最高。 通过对比单纯水重结晶与乙醇-水双溶剂重结晶分离纯化DMY发现采用乙醇-水双溶剂重结晶分离纯化DMY能大大提高纯化效率和产率,经过4次重结晶即可得到纯度为98%以上的产品,大大缩短纯化时间。该方法简单,绿色环保,成本低,适合工业化大规模生产。 本文得到的产品经红外光谱、HPLC色谱分析、1HNMR图谱、质谱等方法鉴定,得出的结构与文献相一致,说明得到的产物为DMY。 2)在pH范围为7-8,反应温度为80℃,反应时间为8h时,分别制备DMY-Zn(Ⅱ)、DMY-Cu(Ⅱ)、DMY-Mn(Ⅱ)配合物。合成的配合物的产率分别为：DMY-Zn(Ⅱ)配合物产率为83%；DMY-Cu(Ⅱ)配合物产率为79%；DMY-Mn(Ⅱ)配合物产率为78%。 经紫外-可见吸收光谱法、红外光谱法、元素分析及热重分析(TG-DTA)检测,结果表明DMY易与Zn2+、Cu2+、Mn2+离子作用生成配合物,其组成分别为[C15H10O8Zn]·2H2O、[C15H10O8Cu]·H2O[C15H10O8Mn·2H2O]·2H2O。 3)通过光谱法和粘度法研究了DMY-Mn(Ⅱ)配合物与DNA的相互作用方式。Stern-Volmer线性猝灭常数Ksq为1.16,结合常数Kb=5.64×104M。结果表明DMY-Mn(Ⅱ)配合物与DNA具有较强的相互作用,能与EB竞争与DNA结合,插入到ctDNA相邻的碱基对中,其作用方式为嵌插作用,