补肾促排卵汤对多囊卵巢综合征排卵功能障碍性不孕症干预机制的研究

目的：通过观察补肾促排卵汤对多囊卵巢综合征排卵功能障碍性不孕症的优势卵泡直径、排卵率、妊娠率以及流产率,以及观察在多囊卵巢综合征模型大鼠中补肾促排卵汤对卵巢形态、性激素水平、AMH、颗粒细胞芳香化酶表达、颗粒细胞凋亡等影响,进而探讨补肾促排卵汤治疗多囊卵巢综合征排卵功能障碍性不孕症的作用机制。方法：1.临床研究：门诊收集多囊卵巢综合征排卵功能障碍性不孕症患者53例,随机分为两组,中药+CC组27例,CC组26例,观察各组优势卵泡直径、总排卵率、子宫内膜厚度、周期妊娠率及流产率。2.实验研究：应用补肾促排卵汤作用于以脱氢表雄酮诱导的PCOS大鼠模型,对卵巢进行形态学分析并检测血清性激素、AMH,采用RT-PCR法及免疫组化,检测PCOS模型大鼠颗粒细胞芳香化酶mRNA及蛋白的表达,采用TUNEL检测颗粒细胞凋亡率,Western blot及免疫组化法检测颗粒细胞中caspase-8、 caspase-3、FASL、FAS蛋白的表达水平。结果：1.临床部分：中药+CC组和CC组相比,补肾促排卵汤可以增加多囊卵巢综合征排卵功能障碍性不孕症患者的平均优势卵泡直径(P<0.05),提高总排卵率(P<0.05),增加子宫内膜厚度(P<0.01),改善子宫内膜的形态(P<0.01),提高周期妊娠率(P<0.05),降低流产率(P<0.05),从而改善了妊娠结局。2.实验部分：与空白对照组相比,模型组大鼠卵巢呈重度弥漫型囊性扩张,并可见到大小不等的囊腔,而发育中各阶段卵泡以及黄体数目均减少(P<0.01)；雄激素升高,AMH升高(P<0.01)；颗粒细胞的芳香化酶mRNA及蛋白的表达降低(P<0.01),凋亡率增加(P<0.05), caspase-8、 caspase-3、FAS、FASL蛋白表达上调(P<0.01)。而中药组与模型组相比,补肾促排卵汤能明显改善PCOS模型大鼠卵巢形态,增加成熟卵泡及黄体数目(P<0.05)、改善性激素水平及AMH水平(P<0.01),显著提高PCOS模型大鼠颗粒细胞芳香化酶mRNA及蛋白的表达(P<0.01),降低颗粒细胞凋亡率(P<0.05),下调caspase-8、caspase-3、 FAS、FASL蛋白表达,与模型组相比,差异明显,有统计学意义(P<0.05)。结论：1.补肾促排卵汤能够提高多囊卵巢综合征排卵功能障碍性不孕症的卵泡质量,提高排卵率,增加子宫内膜厚度,从而提高周期妊娠率,减少流产率,改善妊娠结局。2.脱氢表雄酮诱导的多囊卵巢综合征大鼠模型比较接近人类多囊卵巢综合征。3.补肾促排卵汤能改善PCOS模型大鼠血清性激素水平、降低血清AMH及恢复卵巢排卵功能。4、补肾促排卵汤可以上调PCOS模型大鼠卵巢的颗粒细胞芳香化酶mRNA及蛋白的表达。5、补肾促排卵汤可以减少窦卵泡颗粒细胞凋亡率,下调颗粒细胞caspase-8、caspase-3、 FAS、FASL蛋白的表达。