陈皮多甲氧基黄酮抗肿瘤作用及其机理研究

柑橘类果实是我国传统中药材，随着对柑橘中所含物质成分的明确，发现柑橘中多甲氧基黄酮类物质具有抗肿瘤活性。这一发现近年来引起人们广泛的关注。本研究对陈皮多甲氧基黄酮类成分的的抗肿瘤活性及其机制进行了初步探讨。 第一部分：陈皮多甲氧基黄酮抗肿瘤药效学研究 1陈皮多甲氧基黄酮体外对肿瘤细胞增殖的影响 观察陈皮多甲氧基黄酮体外抗肿瘤活性，选用人肝癌细胞株Bel-7402，人结肠癌细胞株HCT-116，人胃癌细胞株BGC-823，人膀胱癌细胞株EJ，人食管癌细胞株CaEs-17，小鼠肉瘤S180细胞株等6种肿瘤细胞株，采用(methyl thiazolyltetrazolium，MTT)四氮唑蓝比色分析法，用酶标仪检测定其在630nm下OD值。结果表明，陈皮多甲氧基黄酮对6种肿瘤细胞有显著的抑制作用，并随着药物浓度的增加其抑制作用逐渐增强。其IC50值在10～20μg／mL之间，证明陈皮多甲氧基黄酮在体外可以直接抑制肿瘤细胞的增殖。 2陈皮多甲氧基黄酮整体水平抗肿瘤作用实验研究 观察陈皮多甲氧基黄酮对S180肉瘤小鼠肿瘤生长的影响，接种后连续给药7d，取肿瘤，称瘤重，计算抑瘤率。以中剂量组100mg／kg效果最明显，抑瘤率超过40％。观察陈皮多甲氧基黄酮对MGC-803人胃癌-裸鼠移植瘤模型肿瘤生长的影响，接种后连续给药25d，取肿瘤，称重，计算抑瘤率。结果显示，中剂量组100mg／kg对MGC-803人胃癌-裸鼠移植瘤模型肿瘤抑制率超过30％。整体实验结果表明陈皮多甲氧基黄酮在体内可直接抑制肿瘤生长，具有抗肿瘤作用。 第二部分：陈皮多甲氧基黄酮抗肿瘤机理的研究 1陈皮多甲氧基黄酮对对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响 实验采用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型观察陈皮多甲氧基黄酮对鸡胚绒毛尿囊膜模型血管生成的影响。将陈皮多甲氧基黄酮乙酸乙酯溶液浸于微孔滤膜上，鸡胚孵育7d后，将微孔滤膜加载于鸡胚绒毛尿囊膜上，孵育第10d取膜测定绒毛尿囊膜上血管数目及血管面积的变化。结果表明，与模型组比较，陈皮多甲氧基黄酮大、中剂量组血管数目及血管面积比值显著降低。其中中剂量组血管数目减少最为明显，而大剂量组血管面积比值降低最明显。提示陈皮多甲氧基黄酮可以抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管生成。 2陈皮多甲氧基黄酮对血管生长相关因子的影响 取S180小鼠肿瘤，固定于4％中性甲醛溶液中，将肿瘤组织切片，免疫组化法观察陈皮多甲氧基黄酮对S180肿瘤组织中VEGF、bFGF、MVD、p53、bcl-2表达的影响。结果表明，与模型组比较，陈皮多甲氧基黄酮可以显著降低肿瘤组织中VEGF、bFGF、MVD、p53、bcl-2水平，以大剂量组效果最为明显。 3陈皮多甲氧基黄酮对S180肉瘤小鼠血清中细胞因子的影响 用放免法测定陈皮多甲氧基黄酮对S180荷瘤小鼠血清中免疫细胞因子IL-2、IL-6、TNF-α水平的影响。荷瘤小鼠给药7d后，眼眶取血，离心取血清，测定血清中细胞因子浓度，结果显示陈皮多甲氧基黄酮可以升高血清中IL-2水平，以中剂量组100mg／kg升高最为显著：降低血清中IL-6、TNF-α水平，以大剂量组200mg／kg效果最为明显。提示陈皮多甲氧基黄酮可以调节肿瘤小鼠血清中细胞因子的水平。 结论 陈皮多甲氧基黄酮体外及体内可以直接抑制肿瘤生长。其抗肿瘤作用可能是通过调节体内细胞因子水平，从而影响肿瘤组织中血管生成相关因子的表达而抑制肿瘤血管生长，从而产生抗肿瘤的作用。