海参肽的酶法制备工艺及抗疲劳活性研究

本文以鲜海参为原料,研究了利用复合胰蛋白酶水解制备海参肽的工艺,并通过超滤和高效液相色谱相结合的方法测定了海参肽的分子量分布,最后对所得海参肽进行了抗疲劳活性研究。 在酶解工艺优化的研究中,从反应体系的pH、底物浓度、加酶量、反应时间和温度等因素着手,以多肽得率为指标,研究了复合胰蛋白酶酶解海参蛋白的最佳条件,然后在最优酶解条件下酶解制得了海参肽的粗品。同时,从综合利用海参营养成分的角度考虑,分离纯化出了海参多糖。实验结果表明:在不调节体系pH的条件下,复合胰蛋白酶酶解海参蛋白的最佳酶解条件为:底物浓度1%,加酶量8000U/g,酶解温度50℃,水解时间2h。在此条件下进行酶解,多肽得率可以达到34.26%。将粗多糖分离纯化后,以鲜品海参的重量计,多糖得率为0.402%。 海参肽粗品用超滤膜纯化后,用凝胶柱进行高效液相层析,得出了海参肽分子量分布的图谱,结果表明,水解获得的海参肽的分子量较为接近,集中度较高,都在1600Da以下,其中分子量小于1000Da的占到了72.07%。同时说明采用超滤法可以有效去除酶解液中的大分子蛋白。 动物实验证明,海参肽对小白鼠的体重无显著影响,能明显延长小白鼠的负重游泳时间和转棒时间,显著降低运动后小鼠的血尿素氮含量,提高其肝糖原含量,具有增加小鼠运动耐力、促进糖原储备、加速机体的尿素氮代谢的作用,抗疲劳活性非常显著,且功效随着灌胃剂量的提高而增强。