玉米花粉多糖的分离、纯化、结构鉴定及抗氧化活性的研究

近年来,花粉作为优良的全营养食物被全世界广泛关注,掀起一股“花粉研究热”。多年来我国花粉的基础研究和应用研究已全面深入地开展,并取得多方面的可喜成果,有些方面已进入国际研究的前沿。我国的花粉研究是从不同角度、多学科、多领域的参与、综合开展研究的,从花粉资源、花粉有效成分和物质组成,花粉的保健、药理、药效、花粉的扩大应用,花粉的生产技术,加工工艺,新产品开发利用等都展开了广泛而深入的研究,获得了大量的研究成果。 玉米花粉是中国产量最大的花粉之一,受到很大的重视。从八十年代开始,玉米花粉从采收到营养成分的分析到功能因子的研究诸见报端。对玉米花粉多糖的报道主要集中于免疫活性、抗肿瘤等,而关于玉米花粉多糖分离提取及纯化技术,对其各个组分的组成和结构特点的研究未见报道。故,本文侧重于优化玉米花粉多糖提取的技术条件,对玉米花粉多糖的结构进行解析,并在此基础上,用玉米花粉多糖进行体外试验,对其抗氧化的活性功能进行了评价。为今后玉米花粉多糖的更深入的研究与开发奠定了基础。 1、通过对玉米花粉多糖分离纯化的系统研究发现,玉米花粉经水提醇沉,脱脂,Sevage法除蛋白,冷冻干燥后,玉米花粉粗多糖的得率高达8%。玉米花粉粗多糖经乙醇分级,得到三个级分,分别为PPMA、PPMB、PPMC,冻干后样品呈淡黄色絮状固体,得率依次为18.83%、15.36%、60.28%,取PPMC经DEAE-Sephadex A-25柱层析得到级分PPMC-1,其中多糖含量达77%;经Sephadex G-200等方法鉴定和理化分析表明PPMC-1为均一多糖。 2、经氨基酸组成分析,多糖PPMC-1中蛋白质由天门冬氨酸、谷氨酸等16种氨基酸组成,其氨基酸总含量为22.17%,其中赖氨酸、谷氨酸、天门冬氨酸的相对含量较高,而蛋氨酸和半胱氨酸的相对含量较低。 通过薄层及气相色谱法测定玉米花粉多糖PPMC-1的单糖组成,研究表明玉米花粉多糖PPMC-1由葡萄糖、木糖、鼠李糖组成,其摩尔比为:7.08∶5.53∶1。 采用高效液相色谱法测定玉米花粉多糖的摩尔质量,得到PPMC-1的数均分子量和重均分子量分别为2.1317×10～5和2.2008×10～5。 经红外光谱分析,可以确定多糖中存在的特征官能团,且本研究表明PPMC-1中存在呋喃和吡喃两种糖环,且紫外和红外图谱表明玉米花粉多糖PPMC-1中含有蛋白质。 3、通过对小鼠组织及体液的体外试验,研究了不同体系中玉米花粉粗多糖及级分的体外抗氧化活性。对羟基自由基的清除试验表明,不同玉米花粉多糖级分对羟基自由基的清除作用均具有较好的量效关系,复合一元二次方程模型;其半数浓度分别为146.98、172.56、149.98和104.99μg/ml;对超氧阴离子自由基的清除试验表