草乌甲素微乳及其水性基质经皮给药系统研究

草乌甲素是一种从中药中提取得到的难溶性生物碱。药理实验证实草乌甲素有明显的镇痛、抗炎作用和一定的局麻解热作用。其镇痛作用较吗啡强，且无吗啡类镇痛药的成瘾性，起效比吗啡慢，更适于各种慢性疼痛疾患的治疗，临床证实对肩周炎、风湿及类风湿关节炎、良性关节痛、腰及四肢关节扭伤、带状疱疹、晚期癌症疼痛等疗效显著。但是，草乌甲素治疗的安全窗较窄，LD50与ED50相差仅10倍，现有的口服制剂或注射剂临床使用过程中血药浓度波动较大，毒副反应的发生与剂量相关。 目的：将难溶性药物草乌甲素制成粒径在100nm以下的水包油微乳，改善草乌甲素溶解度，提高化学稳定性，促进透皮吸收。在此基础上，探讨微乳释药机制及促透机理，并采用水溶性基质材料制备微乳水性巴布剂贴片，提高经皮给药的生物利用度，减小血药浓度波动，延长释药时间，减少用药次数，降低毒副反应，实现安全、高效、稳定和方便的用药目的。 方法：①微乳研究。以溶解度为指标选择合适的油相溶剂。考察不同表面活性剂和助表面活性剂对微乳外观性状及粒径的影响，绘制伪三元相图，确定微乳区域。通过体外透皮试验优化微乳处方组成及载药量。测定微乳溶解度、透皮速率、渗透系数及对皮肤微观结构的影响，将结果与草乌甲素饱和水溶液、草乌甲素饱和缓冲盐溶液及不含油相的胶束溶液进行比较，探讨微乳透皮释药机制及促透作用机理。考察微乳室温存放稳定性，评价微乳对药物的稳定作用。②微乳水性基质贴片研究。以卡波姆和聚丙烯酸钠为粘性剂制备微乳水性基质巴布剂。单因素考察粘性剂用量、交联剂用量及微乳加入量对贴片粘性的影响。正交试验优选贴片处方。通过质量研究、稳定性考察和家兔皮肤刺激性试验，评价微乳水性基质贴片的质量可控性和用药安全性。③体内药代动力学研究。建立LC-MS／MS体内测定方法，并进行系统方法学考察。以口服灌胃制剂和压敏胶水不溶性基质贴片为参比，通过血药浓度测定及主要药代动力学参数计算，评价微乳水性基质贴片的体内吸收特征。 结果：①微乳研究。药物在油酸具有较高的溶解度。以聚氧乙烯氢化蓖麻油（Cremophor RH40）为表面活性剂，二乙二醇单乙基醚（Trascutol P）为助表面活性剂，可形成粒度＜100nm的微乳。以4％油酸为油相，Cre RH40／Tra P（1∶1）为混合乳化剂，乳化剂用量为40％时，可制备外观良好、粒径分布均匀、粘度适中的载药微乳。饱和微乳载药量高达19.2mg／ml，载药量为6.3mg／ml时即可达到与饱和微乳相近的渗透速度Js=97.72±10.89μg／cm2·h，表明微乳透皮给药存在饱和现象，透皮速率并不随载药量的增加而无限增加。微乳的增溶作用是经皮促透的主要原因，此外，水包油乳滴既具亲水性又具亲脂性，有利于药物向皮肤内渗透。微乳中的药物存在于乳滴的内油相或油水界面，室温放置6个月质量稳定。②微乳水性基质贴片研究。以4％聚丙烯酸钠和3％卡波姆为粘性材料，25％甘油为保湿剂，0.3％水合氯化铝为交联剂，0.3％柠檬酸为助交联剂，处方中加入10％的含药微乳（6.3mg／ml），制备载药量为100μg／cm2的微乳水性基质贴片，质量考察结果表明，贴片粘性适中，含量均匀度好，体外渗透速率为9.0μg／cm2／h1／2，室温放置6个月质量稳定、对皮肤无明显刺激性。③体内药代动力学研究。LC-MS／MS体内测定方法专属性强、灵敏度高、线性范围宽、精密度好，方法回收率和提取回收率均符合生物样品分析的要求。与压敏胶贴片相比，微乳水性基质贴片Tmax减小，Cmax增加，AUC升高，MRT延长，相对生物利用度增加3-4倍，说明其吸收速率和吸收程度均优于胶粘骨架贴片。与口服给药相比，微乳水性基质贴片缓控释特点明显，Tmax和MRT均显著延长，Cmax显著降低，相对生物利用度约为47.49％。 结论：水包油微乳使草乌甲素的溶解度增加，稳定性改善，透皮速率显著提高。将微乳制成水性基质贴片，体内吸收速率快，驻留时间长，释药速率平稳，生物吸收程度，比胶粘骨架水不溶性基质贴片提高3-4倍，本文研究结果为开发高效、低毒、方便、稳定的新型经皮给药系统奠定了基础。