灵芝多糖抗病毒和抗肿瘤作用机制研究

从发酵得到的灵芝菌丝体中分离得到一种多糖成分GLP,并对它的细胞毒作用、抗病毒活性及抗肿瘤作用进行了研究。采用热水抽提和乙醇沉淀的方法从灵芝菌丝体中得到灵芝多糖的粗制品,再用离子交换和分子筛的方法从多糖中分离得到5个不同的峰的灵芝多糖,经含量测定证明第二个峰所含有的灵芝多糖占总的多糖含量的42%,分子量测定表明该峰的多糖的分子量约为30～50Kda,硫酸—酚试验和Lowry-Folin试验分别检测多糖和蛋白质的含量分别为86.4%和8.3%,多糖与蛋白质的比例为10.4:1,命名该峰的多糖为GLP。 采用台盼兰和MTT法检测了GLP对体外培养的非洲绿猴肾细胞Vero细胞的毒性作用。结果表明,GLP对Vero细胞无毒,即使GLP浓度高达2000μg/mL,GLP对细胞也没有任何毒副影响,细胞的活力仍可达到98%以上。 GLP能够抑制单纯疱疹病毒Ⅰ型（herpes simplex virus type 1,HSV-1）和单纯疱疹病毒Ⅱ型（herpes simplex virus type 2,HSV-2）感染Vero细胞并抑制病毒感染引起的细胞病变。CCID50试验表明,GLP能强烈地抑制单纯疱疹病毒Ⅰ型和单纯疱疹病毒Ⅱ型感染细胞。在病毒感染细胞前将GLP和疱疹病毒混合孵育1小时,然后再感染Vero细胞,GLP抑制单纯疱疹病毒Ⅰ型和单纯疱疹病毒Ⅱ型的EC50(50%effective concentration,EC50)值分别为15.37和16.75μg/mL;如果GLP不预先与病毒孵育而和病毒同时加入到Vero细胞中,这时GLP抑制单纯疱疹病毒Ⅰ型和单纯疱疹病毒Ⅱ型的EC50值分别为17.22和18.91μg/mL;但是在单纯疱疹病毒Ⅰ型和单纯疱疹病毒Ⅱ型感染Vero细胞2小时后再加入GLP,这时GLP抑制单纯疱疹