紫锥菊、紫甘薯中活性成分高效制备技术及紫锥菊生物活性研究

为进一步研究植物中化学成分及其生理活性,本论文对紫锥菊多种化学成分进行制备分离、活性筛选及紫甘薯中主要化学成分的制备分离,取得主要结果如下： 1、采用高速逆流色谱与制备液相色谱技术制备分离得到紫锥菊中13个高纯度化合物,经鉴定,3个为新化合物：2-O-异阿魏酰基酒石酸、2-O-咖啡酰基-3-O-异阿魏酰酒石酸、及2,3-O-双异阿魏酰基酒石酸。 2、采用高速逆流色谱技术从国产紫甘薯中分离制备得到4个化合物,经质谱、核磁共振、紫外等技术进行结构鉴定,分别为3-O-{6-O-(E)-咖啡酰-2-O-[6-O-(E)-对羟基苯甲酰-β-D-吡喃葡糖基]-β-D-吡喃葡糖苷}-[5-O-(β-D-吡喃葡糖苷)]芍药素、3-O-{6-O-(E)-咖啡酰-2-O-[6-O-(E)-阿魏酰-β-D-吡喃葡糖基]-β-D-吡喃葡糖苷}-[5-O-(β-D-吡喃葡糖苷)]芍药素、3-O-咖啡酰基奎宁酸,3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸。 3、采用流感病毒神经氨酸酶抑制模型研究了紫锥菊单体化合物及不同规格提取物对流感病毒A/PR/8/34(H1N1)神经氨酸酶的抑制作用。结果表明,7个肉桂酸类化合物均显示出显著抑制作用,其中菊苣酸的抑制作用最强(IC50=5.68±0.19μg/mL),表明紫锥菊具有潜在的抗病毒活性。 4、采用磺酰罗丹明B染色法研究了紫锥菊单体化合物及不同规格提取物对人肝癌BEL-7402及人乳腺癌MCF-7细胞株的抑制作用。结果表明,肉桂酸类化合物及烷基酰胺单体化合物对肿瘤细胞抑制作用较弱,但烷基酰胺类混合物对两种肿瘤细胞的抑制作用较强,半抑制浓度IC50分别为0.05mg/mL、0.03mg/mL。 5、采用趋化因子受体拮抗剂筛选模型研究了紫锥菊单体化合物及不同规格提取物对趋化因子受体CXCR4、CCR5的拮抗作用。结果表明,各样品仅具有较弱的拮抗作用,表明紫锥菊对HIV病毒侵入宿主细胞时的抑制作用不明显。 6、研究了紫锥菊单体化合物及不同规格提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、溶血性链球菌的抑制作用。结果表明各样品均无抑制作用。 7、对紫锥菊肉桂酸类化合物进行体外抗氧化作用及其构效关系研究,结果表明化合物抗氧化性强弱基本表现为：菊苣酸、2-O-咖啡酰基酒石酸、2-O-咖啡酰基-3-O-阿魏酰酒石酸、2,3-O-双异阿魏酰基酒石酸、2-O-异阿魏酰基酒石酸；体外抗氧化活性大小与咖啡酸苯环上的酚羟基位置、数目相关,其中对位酚羟基的活性最强,邻位羟基较弱；对DNA损伤均具有显著保护作用,但构效关系不明显。 8、建立了HPLC-PDA方法同时检测紫锥菊中7个肉桂酸及5个烷基酰胺类化合物的方法,通过梯度洗脱于60min内可在C18反相色谱柱上完全分离,样品预处理简单,可作为紫锥菊E.purpurea中活性成分的标准检测方法。