黄连（Rhizaoma Coptidis）的指纹图谱研究

黄连(Rhizaoma Coptidis)为毛茛科多年生常绿草本阴性植物,以干燥的根茎入药,是最常用中药之一。具有泻火解毒,燥湿止泻等功效;主治时行热毒,热盛心烦,口干口苦,腹泻,菌痢,消渴,疳疾,蛔虫病,湿疹,汤火烫伤等症;临床证明该药材有抗菌、抗病毒、消炎、降血糖、抗癌等作用。根据史料记载,早在元末明初时,石柱县就已有人种植黄连,现今,重庆石柱黄连是我国黄连药材的主要产区之一,并已通过国家中药材GAP认证,是获得国家“地理标志产品”认证的中药材品种。 由于中药质量优劣直接关系到用药者的健康与安全。为了保障人民安全用药,国家对药品的质量和检验方法作出了相应的规定,要求中药生产和使用部门必须遵守中药质量标准。中药质量标准主要是对中药中某一或某些成分进行定性或定量分析研究,首先根据中药材自身特性,选定药材中的“有效成分”或“活性成分”为指标成分,借助一些方法和手段,建立该中药材有效的鉴别方法和含量测定方法,其中可以包括药材的理化鉴别,光谱、色谱鉴别和含量的测定。黄连是我国传统中医常用中药材,以往对黄连药材的质量评价,主要是根据产地与外观进行鉴别。目前,常用的办法除了观察黄连的外观性状,粉末颜色和形状大小外,根据2005年版药典规定,还加入了黄连的药材常规项目检查和小檗碱的含量的测定,从而控制黄连药材的质量,如要求醇浸出物含量不低于20%,总灰分含量不得超过5.0%,酸不溶性灰分含量不得超过1%,含水量不易高过14%,小檗碱的含量不得低于5%。经查阅大量文献资料,得出黄连中小檗碱的含量测定方法主要有薄层扫描法、高效液相色谱法、高效毛细管电泳法等;而高效液相色谱法是人们普遍使用的方法,该方法简单,准确。该方法主要是指中药材经适当处理后,采用一定的仪器和分析手段,测得能够标识该中药材及其制剂中的各种组分群体特性的共有峰的图谱。通过中药指纹图谱主要特征峰的相对保留时间及含量或比例的制定和对比,从而有效地控制中药产品的质量,并保证产品质量的相对稳定性。中药指纹图谱特有的专属性,不仅包括了已知成分,还包括了未知成分。不仅包括了对已知成份的分析,还包括了对已知成份与各未知成份之间的相对含量分析。因此,中药指纹图谱真正体现了对中药内在质量的综合评价和全面控制,尤其适用于有效成分不完全明确、或不需要完全明确的情况下,对中药材及其制剂的质量控制。 本文研究了重庆市道地药材黄连原植物特征和生药学性状,对其植物显微结构有所了解;并通过紫外分光光度法和高效液相色谱法对位于海拔1850m出1-5年生,1750m处2-5年生石柱县黄连(味连)、湖北、四川、河南市售黄连(味连)、云南黄连、日本黄连中总生物碱和小檗碱含量进行测定,研究结果显示,云连(2号)和日本黄连(15号)中生物碱含量和小檗碱含量均较低;其他各产地黄连中生物碱含量和小檗碱含量没有明显差异,其中小檗碱含量在5%-8%之间,说明各地市场上销售的中药材黄连质量较好,有效成分较高;通过紫外分光光度法对不同海拔、不同年限处重庆石柱黄连中总生物碱含量的测定,研究结果显示,不同海拔、不同生长年限对2-5年生黄连中总生物碱没有什么影响,从黄连不同部位上比较总生物碱含量,可以得出,根茎＞须根＞叶片;在同一海拔处,2-5年生黄连中主要成分含量接近,但是,2-3年生黄连根茎细小、不饱满、粉性差、须根较多,4-5年生黄根茎较粗壮、饱满;仅一年生黄连中含量较低;通过HPLC法对黄连花进行小檗碱含量测定,发现该部位中小檗碱含量达到1.25%,并且据有关文献报道,黄连的花中富含人体所需的大量氨基酸,可以开发成很好的保健食品。 通过分析所测得各供试样品中主要药用成分(小檗碱)含量变化,优化药材供试液提取条件与HPLC色谱条件,建立不同产地黄连化学成分色谱指纹图谱,完善黄连药材的质量标准,同时从药材关键成分含量限度方面建立不同年限、不同海拔处重庆石柱黄连小檗碱特征性化学成分指纹图谱,为重庆市道地药材黄连的规范化种植提供可靠依据。同时通过对黄连的须根及叶片中总生物碱含量的测定,探讨重庆石柱黄连在生长过程中的质量变化规律,在今后的黄连药材种植时,可以从遮阴条件、水分、温度、施肥等方面提高黄连产量,保证黄连质量,从而为中药材规范化种植提供科学可靠的理论指导。