本研究的目的是分离选育出天然具有抗逆性和益生特性的乳酸杆菌,优化各菌株组合后制成专门用于早期断奶仔猪的益生素。同时探讨该制剂对人工感染大肠杆菌断奶仔猪的保护力和日粮中添加该制剂对断奶仔猪生长性能的影响及其作用机理。从胃肠粘膜上分离出1220 株胃乳酸杆菌和5789 株肠乳酸杆菌;应用体外法选育出能在pH3.0 中生长、耐250 mg/kg 铜和抗大肠杆菌能力强的胃乳酸杆菌一株,选育出在pH2.5 处理8 h 后存活率达18%以上、能在0.3%胆盐和250 mg/kg 铜的肉汤中生长以及抗大肠杆菌能力强的十二指肠、空肠和结肠乳酸杆菌各一株。系统研究了4 株乳酸杆菌的生长曲线,75℃处理15 min 的存活率,贮藏1 个月后的存活率和pH2.0 处理6 h 后的存活率;采用均匀设计法,优化了6 个影响乳酸杆菌发酵的因素。结果表明,格氏乳酸杆菌的耐热存活率为72%,贮藏存活率为37.8%,耐酸存活率为133%,优化的发酵参数为:时间20 h,葡萄糖110 g/L,蔗糖60 g/L,胰蛋白胨30 g/L,酵母浸粉30 g/L,柠檬酸铵2 g/L;罗伊氏乳酸杆菌的耐热存活率为31.3%,贮藏存活率为85.5%,耐酸存活率为34.4%,发酵参数为:时间20 h,葡萄糖10 g/L,蔗糖60 g/L,胰蛋白胨30 g/L,酵母浸粉5 g/L,柠檬酸铵12 g/L;嗜酸乳酸杆菌的耐热存活率为62.5%,贮藏存活率为59%,耐酸存活率69.5%,发酵参数为:时间20 h,葡萄糖110 g/L,蔗糖10 g/L,胰蛋白胨5 g/L,酵母浸粉30 g/L,柠檬酸盐12 g/L;发酵乳酸杆菌的耐热存活率为45.1%,贮藏存活率为78.4%,耐酸存活率为80.9%,发酵参数为:时间20 h,葡萄糖10 g/L,蔗糖60 g/L,胰蛋白胨30 g/L,酵母浸粉30 g/L,柠檬酸盐12 g/L。应用均匀设计法以仔猪日增重、饲料采食量和腹泻作为指标对4 株乳酸杆菌进行组合优化。试验结果表明,4 株乳酸杆菌对断奶仔猪的生长性能和腹泻有明显的互作效应。综合各因素的影响,各菌株在日粮中的优化比例为:格氏乳酸杆菌:罗伊氏乳酸杆菌:嗜酸乳酸杆菌:发酵乳酸杆菌= 2:3:5:2。
将12 头健康断奶仔猪随机分成2 组,大肠杆菌攻毒前7 d,试验组口服乳酸杆菌制剂,对照组饮自来水。试验组腹泻发病率比对照组下降69.1%,腹泻指数下降了66。在大部分胃肠道食糜和粘膜,试验组仔猪大肠杆菌、肠杆菌和好氧菌数量显著低于对照组,而乳酸杆菌、双歧杆菌和厌氧菌总数显著地高于对照组。将36 头断奶仔猪随机分成2 组,试验组为基础日粮添加乳酸杆菌制剂;对照组为基础日粮添加50 mg/kg 卡巴氧。0～14 d 试验组仔猪平均日增重比对照组提高30.2%,日采食量比对照组提高23.9%(P<0.01)。试验组血清尿素氮水平比对照组显著降低(P<0.01),试验组粗蛋白质和总磷的表观消化率提高(P<0.05)。在大部分胃肠道食糜和粘膜,试验组乳酸杆菌、双歧杆菌、厌氧菌总数、大肠杆菌、肠杆菌和好氧菌总数都显著高于对照组。本研究结果表明,复合乳酸杆菌制剂主要通过改善胃肠道菌群平衡来促进断奶前期仔猪的生长,提高断奶仔猪对大肠杆菌攻毒的抵抗力。
