桑黄水溶性多糖的分离纯化及结构研究

本文着重对桑黄(Phellinus igniariu)菌丝发酵工艺进行了初步的检测,并对其产物中的桑黄多糖进行了分离、纯化,在此基础上对桑黄多糖进行结构分析,推测出桑黄多糖的可能结构。 首先检测了桑黄发酵工艺,本文主要测定了几批桑黄菌丝发酵产物糖含量、蛋白质含量、寡糖含量、单糖组成、分子量分布及其蛋白质的氨基酸组成,微量元素的组成与含量。结果表明几批桑黄菌丝发酵产物的组成及各组分含量相近,发酵工艺基本稳定。 本文重点对桑黄菌丝发酵多糖进行了比较系统地研究。首先采用水煮提取法从桑黄发酵粉中提取出桑黄粗多糖;用苯酚-硫酸法测定其糖含量;凯氏定氮仪测定粗多糖蛋白含量;用气相色谱法测定其单糖组成。粗多糖经酶法与Sevag法联合脱蛋白,冻融分级后,得糖样PIP。将PIP经Sepharose CL-6B制备柱收集得到PIP2,采用高效液相检验其纯度后,又采用部分酸水解,高碘酸氧化,Simth降解,I.R.分析,G.C.分析,甲基化分析等方法对PIP2的结构进行初步研究。 结果表明:PIP2为中性杂同多糖,分子量约为1.8万;PIP2主要由β型糖苷键构成,少分枝结构,平均每10个己糖残基有1.5个分支;其主体结构由Glc组成。其中(1→4)Glc构成主链的核心结构;(1→4)Glc在O-3处有分枝;支链部分由(1→3)Glc以不同聚合度构成,末端基为Glc。