白术抗氧化活性成分的提取及鉴定研究

白术在医药行业和保健行业极具开发价值,本文主要对白术抗氧化活性成分进行提取和鉴定进行研究,为白术的开发和应用提供理论参考,本文主要分成三个部分。(1)白术抗氧化活性成分的提取条件优化以白术提取物的得率及抗氧化活性为指标,选择甲醇体积分数、料液比、提取时间、提取温度为自变量,采用单因素实验和响应面法对白术提取工艺进行优化。结果表明优化条件为:甲醇体积分数为87%、液料比35(ml/g)、提取温度为62℃、提取时间为1.5 h,在上述条件下白术得率为42.23%,与模型的预期值42.25%基本相符。对最佳的提取条件下的白术提取物进行抗氧化的测定,得出清除DPPH自由基的Ic50值为0.238 g/l,清除率比较好。(2)白术提取物抗氧化活性部位的确定为深入研究白术的抗氧化活性成分,将白术87%的甲醇提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,得到不同溶剂萃取物,以清除ABTS自由基和DPPH自由基的能力以及总还原能力为评价指标,研究各萃取物的抗氧化活性,并探究抗氧化活性与总多酚、总黄酮以及总多糖含量之间关系。结果表明:白术不同极性萃取物均有抗氧化活性,其中乙酸乙酯相的抗氧化活性最好,清除ABTS自由基和DPPH自由基的Ic50值分别为0.021±0.003 mg/ml、0.031±0.005mg/ml,而且乙酸乙酯相中总多酚和总黄酮含量最高,分别是37.5±0.51%和30.5±0.92%。清除ABTS,DPPH自由基的Ic50值,总还原能力与总多酚含量呈现相关关系(r=-0.901,r=-0.870,r=0.969),清除ABTS,DPPH自由基的Ic50,总还原能力与总黄酮含量呈现显著相关关系(r=-0.912,r=-0.976,r=0.913),白术各萃取物中黄酮类和多酚类可能是主要抗氧化物质。(3)抗氧化活性成分的鉴定及含量测定为追踪白术的具体抗氧化物质,以清除DPPH自由基的抗氧化活性为指标,采用柱色谱法继续将乙酸乙酯相分离,得到活性最好的样品,该样品经高效液相色谱,质谱等技术的分析,分析其化学成分,将鉴定出的物质进行定量和抗氧化活性的测定。结果表明:经色谱柱法纯化后所得组分中,抗氧化活性最好的C5组分清除DPPH自由基Ic50值为0.021(mg/ml)。经质谱、高效液相色谱和标准品比对,鉴定出其中含有6种化合物,分别为绿原酸、咖啡酸、阿魏酸、异牡荆苷、异绿原酸A、异绿原酸C,其含量大小依次为异绿原酸A>异绿原酸C>绿原酸>阿魏酸>异牧荆苷>咖啡酸,分别为80.26(mg/g)、77.79(mg/g)、38.12(mg/g)、3.31(mg/g)、1.21(mg/g)、1.14(mg/g)。对6种化合物进行抗氧化活性测定,抗氧化活性能力大小依次为异绿原酸C>异绿原酸A>绿原酸>阿魏酸>咖啡酸>异牧荆苷。