腰痛宁胶囊等组方中药材多糖的制备与质量评价

本文选取腰痛宁胶囊组方中含有多糖的药材：甘草、麻黄、川牛膝、苍术,风湿痹病的常用组方中含有多糖的药材：黄芪、三七、淫羊藿、桑寄生,以及腰痛宁胶囊的药引黄酒为原料,制备其多糖并进行质量分析与活性评价。 以黄芪药材为样品,以单因素考察、正交试验设计优化多糖的提取条件,并采用优化的提取、纯化工艺条件制备了9种多糖。采用紫外光谱法(UV)测定了9种多糖的多糖含量及还原糖含量,建立了1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化-高效液相色谱法(HPLC)对甘露糖(Man)、核糖(Rib)、鼠李糖(Rha)、葡萄糖醛酸(GlcU)、半乳糖醛酸(GalU)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、木糖(Xyl)、阿拉伯糖(Ara)9种单糖标准品进行分离并检测了9种多糖样品的单糖组成。对各多糖样品的单糖组成进行了主成分投影分析以初步比较多糖样品间一级结构的差异。采用还原能力、清除羟基自由基能力、清除超氧阴离子自由基能力、清除DPPH自由基能力、对黄嘌呤氧化酶抑制能力5种方法检测了9种多糖的体外抗氧化活性。 黄芪多糖的最优制备条件为：水煮提取3.5h,料液比1：13,提取3次,60%乙醇醇沉,Sevag法脱蛋白,大孔树脂法脱色,超滤法除去小分子杂质。分析结果表明各多糖样品的多糖含量不同,且均含有一定的还原糖,各多糖中的单糖组成具有较大差异,9个多糖样品的一级结构有良好的代表性。除抑制黄嘌呤氧化酶能力的方法以外,9种多糖在还原能力、清除·OH及·02能力、清除DPPH自由基的方法中均表现出明显的活性-浓度依赖关系。与腰痛宁胶囊组方相关的黄酒多糖的还原性及清除DPPH自由基能力最强,与其他非腰痛宁胶囊组方中的4种药材多糖比较而言,腰痛宁胶囊组方中的川牛膝、苍术多糖在各方法中活性较弱,无明显功效。