茶皂素提取纯化及其抗菌活性研究

茶皂素是从山茶科(Theaceae)山茶属(Camellia)植物中提取出来的一类齐墩果烷型三萜类皂甙的混合物。近三十年的研究表明，它具有良好的表面活性的同时，又具有多种生物学活性。特别是近年来的药理活性研究发现，茶皂素具有抗菌消炎、杀灭病毒、抗氧化、抗高血压、抑制酒精吸收保护肠胃、以及杀虫驱虫等药理学功能。茶皂素具有广阔的应用前景。 本文对两种常用的茶皂素定量分析方法：香草醛-浓硫酸显色法和测定糖体定量法进行了比较分析，并用自制的标准品绘制了茶皂素定量测定的工作曲线，为提取和纯化工艺中的定量分析奠定了基础；本文重点研究了从油茶饼粕中分离提纯茶皂素的工艺，在提高茶皂素的得率的基础上得到了高纯度的茶皂素产品；为了扩大茶皂素的应用范围，对茶皂素的抗菌活性进行了初步探索。 定量分析方法的研究结果表明，两种定量方法都适合于茶皂素的定量分析，但各有优缺。香草醛-浓硫酸显色法是最常用的皂甙定量方法，它具有反应灵敏，操作相对简单，操作流程短等优点，但是，反应条件要求控制严格，否则易造成实验误差。测定糖体定量法具有显色相对稳定，反应条件容易控制，但试剂消耗量大，操作流程长，被测样品需经过初步纯化等缺点。两种检测方法在严格控制反应条件的情况下，都能准确的定量茶皂素产品。 本文侧重对茶皂素的分离纯化方法的研究，得出了树脂吸附法和溶剂萃取法两种适合茶皂素分离纯化的工艺流程。筛选出一种适合茶皂素生产的国产苯乙烯共聚树脂，并对树脂的吸附及解吸性能进行了优化选择；对溶剂萃取法的各个工艺过程进行了详细的实验探索，得出了较佳的溶剂法生产茶皂素的工艺流程，使得产品得率和纯度进一步提高；首次使用了一种安全、无毒的溶剂实现茶皂素的初步结晶，避免了有毒有机溶剂对环境的污染，且得到了高纯度茶皂素产品。 茶皂素粗提物对食品腐败细菌、真菌以及植物病原真菌的抗菌实验结果表明，茶皂素对各种细菌和真菌均有不同程度的抑制作用，且抑菌效果与茶皂素浓度呈正相关。茶皂素粗提物对食品腐败菌中细菌和曲霉属(Aspergillus)真菌抑制能力较弱，而对青霉菌(Penicillium glaueus)和单细胞真菌啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiate)的抑菌能力较强，尤其对啤酒 酵母pocharo叫es cerevisiQte）的抑菌效果最好，其最低杀菌浓度 MIC值为 3．Zing／ttil；茶皂素粗提物对植物病原真菌小麦纹枯病菌吠hizoctonia cerealis vander HOven）和棉花黄萎病菌（Verticillium dahliae）有较强的抑菌作用，其 EC。。分别为：80刀9和 169．24mg／thl。研究结果还表明，茶皂素作为抑菌活性 物质对不同的菌种有一定的选择性，并且有着潜在的应用价值和广泛的应用 前景。