韭菜子盐炙前后温补肾阳的机理研究

韭菜子为百合科植物韭菜Alliium tuberosum Rottl的干燥成熟种子；辛、甘、温,归肝、肾经；功能为温补肝肾,壮阳固精；用于阳痿遗精,腰膝酸痛,遗尿尿频,白浊带下。《中国药典》“炮制”项下分列“韭菜子”和“盐韭菜子”两个饮片品种,其中“韭菜子”由韭菜子“除去杂质”而来,“盐韭菜子”由净韭菜子“照盐水炙法炒干”而成。韭菜子生品较少应用,临床多用盐炙品,盐炙后可引药下行,增强补肾固精作用。 目的 本文选用韭菜子为研究对象,基于古今对其炮制方法存在较大差异的历史背景,以不同炮制方法对韭菜子“温补肾阳”作用的影响为切入点,拟初步阐明盐韭菜子“温补肾阳”作用的机理和物质基础,进而解释韭菜子“盐制入肾”理论的科学内涵,并在阐明这一功效药效物质的基础上,初步研究韭菜子盐炙工艺和盐炙品质量标准。 方法 采用文献学、药理学和化学相结合的手段开展韭菜子盐炙的炮制学研究。 1采用文献学方法,整理中药韭菜子的炮制历史沿革,搞清中药韭菜子炮制的历史情况和现代应用现状。 2采用药理学方法,开展韭菜子四种炮制品温补肾阳功效的药效学对比研究,并探讨其可能的作用机制,认识韭菜子不同炮制方法对温补肾阳作用的影响。 3温补肾阳作用机理研究：在肾阳虚模型基础上,进行小鼠交配实验、大鼠生殖器官重量、睾丸组织学观察；并测定小鼠血浆促肾上腺皮质激素含量和血清睾酮含量。 4采用化学方法,以药效为导向,筛选盐韭菜子温补肾阳作用的有效部位,并用指纹图谱技术控制有效浸出物的质量。 5在上述研究的基础上,开展韭菜子盐炙工艺和盐炙饮片质量标准的初步研究。 结果 1韭菜子具有降低肾阳虚小鼠肾上腺中VitC含量和延长肾阳虚小鼠耐寒死亡时间的作用。韭菜子经盐炙后其降低肾阳虚小鼠肾上腺中VitC含量作用进一步增强,生韭菜子在成人日服剂量100倍时起效,而盐韭菜子在成人日服剂量60倍时起效,辅料食盐和韭菜子具协同增效作用。韭菜子经酒炙后延长肾阳虚小鼠耐寒死亡时间的作用进一步增强,生韭菜子在成人日服剂量140倍时起效,而酒韭菜子在成人日服剂量80倍时起效,辅料黄酒和韭菜子具协同增效作用。 2韭菜子生品和盐炙品均可显著提高肾阳虚小鼠血浆促肾上腺皮质激素和血清睾酮的含量,并能提高肾阳虚小鼠交配能力,其中盐炙品提高血浆促肾上腺皮质激素含量的作用强于生品。韭菜子生品和盐炙品均可显著提高肾阳虚大鼠睾丸脏重系数,并能提高各级生精细胞数量,其中盐炙品提高初级精母细胞一次级精母细胞和精子细胞数量的作用强于生品。 3“醇水双提-正丁醇浸出物+食盐”是盐韭菜子“温补肾阳”作用的有效部位；采用HPLC技术对该部位建立了指纹图谱。 4初步建立的韭菜子盐炙工艺是：每100kg药材加入2kg食盐,同时加入55kg水,常温润制6小时后置于150℃炒置容器内,以40次／min的翻炒频率炒制15分钟。 结论 韭菜子具有一定温补肾阳的作用,不同炮制方法对其疗效有所影响,盐炙后能进一步增强肾上腺皮质功能,酒炙后能进一步提高耐寒能力,炒制后能利于药材粉碎促进成分溶出,说明古人采用炒制的炮制方法并有“酒糊为丸,盐汤送服”用药要求的科学合理性,也为现代韭菜子采用盐炙法找到了科学依据。辅料食盐和黄酒对韭菜子温补肾阳作用具协同增效作用。“醇水双提-正丁醇浸出物+食盐”是盐韭菜子“温补肾阳”作用的有效部位。盐韭菜子温补肾阳的机理在于增加促肾上腺皮质激素的分泌而促进肾上腺皮质功能；提高交配能力、睾丸脏重系数和曲细精管内各级生精细胞数量,该作用可能与促进睾酮的分泌和释放有关。 创新点 1初步阐明盐炙、酒炙和炒制三种炮制方法对韭菜子温补肾阳作用的影响。 2研究食盐和黄酒两种辅料与韭菜子温补肾阳作用的相关性,初步阐明两种辅料与韭菜子温补肾阳作用的协同增效关系,为中药“盐炙入肾”和用酒“以热助热”的传统炮制理论找到了一定的科学依据。3初步阐明盐韭菜子温补肾阳作用的物质基础和机制。