麒麟菜多糖的提取工艺、结构测定及抗病毒活性研究

本文对采自海南省琼海市麒麟菜养殖基地的红藻琼枝麒麟菜Eucheuma gelatinae和异枝麒麟菜Eucheuma striatum中的硫酸多糖进行了提取、分离和化学结构测定，并就各多糖样品对HSV-1和CVB3的抗病毒活性进行研究，初步探讨麒麟菜硫酸多糖的抗病毒机理和构效关系。 采用直接水提法和KCl分级法对琼枝麒麟菜和异枝麒麟菜中的多糖进行提取，并用DEAE离子交换柱层析法对两种麒麟菜中溶于KCl和不溶于KCl的多糖进行分离纯化。分别用蒽酮—硫酸法、间苯二酚法、BaCl2比浊法测定多糖样品的总糖含量、3,6-内醚半乳糖含量和总硫酸基含量；用红外光谱法确定多糖样品的特征基团；用气质联用法初步测定麒麟菜硫酸多糖的化学组成。 采用体外细胞培养法对琼枝和异枝麒麟菜硫酸多糖的抗HSV-1和CVB3活性进行筛选。用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）测定多糖对非洲绿猴肾细胞（Vero）的细胞毒性，用细胞病变（CPE）抑制法测定多糖的抗病毒活性。结果表明琼枝和异枝麒麟菜硫酸多糖对HSV-1和CVB3均有良好抗病毒活性，而且对Vero的细胞毒性低。就抗病毒活性而言，部分麒麟菜硫酸多糖样品优于阳性对照药物阿昔洛韦和病毒唑。麒麟菜硫酸多糖不仅可以有效地杀灭上述两种病毒，而且可以有效地保护Vero细胞免受病毒的攻击。活性研究结果表明，麒麟菜硫酸多糖样品的抗病毒活性与其硫酸基的含量有很大的关系，还与样品的分子量、多糖所属类型和分子链柔性等因素有关。 本文还采用正交实验法对异枝麒麟菜中溶于KCl部分的且具有显著抗病毒活性的多糖样品（ESSPA）进行了提取工艺研究，确定了最佳提取工艺。