苍术炒焦工艺及炒焦前后药效学与化学成分对比研究

苍术为临床常用中药,其炮制入药历史悠久。古代本草记载的主要炮制方法有18类,现今常用麸炒、炒焦、米泔水制等方法。全国各地的炮制规范除了个别地区保留了土炒苍术、米泔水制苍术之外,麸炒苍术和焦苍术为最常用的饮片种类。然而目前对苍术的研究主要集中在麸炒品,对焦品的研究甚少。苍术生品温燥而辛烈,燥湿、祛风、散寒能力强。炒焦后可缓和苍术燥性[1],增强健脾止泻的作用。该作用临床实践已经被证明,但其炮制机理尚不清楚,因此限制了对苍术的进一步开发和应用。基于上述观点,本文作为国家自然基金项目“苍术炒焦长于“健脾止泻”的物质基础与作用机理研究”（81541080）的一部分,将着重研究苍术炒焦前后水提物和挥发油部位的药效学和化学成分变化,为研究苍术炒焦之后健脾止泻作用增强的机理和物质基础奠定基础。采用正交实验设计法,以多指标综合评分析,对苍术炒焦工艺进行筛选,以温度、时间、翻炒频率为考察因素,以腹泻指数、鞣质含量为考察指标,综合评价实验结果,筛选最佳炒焦工艺。最佳炒焦工艺为150g苍术,温度220～230℃时投药,以50次/min的翻炒频率,炒制6min。其中3个考察因素中翻炒频率不具有显著性差异。为明确生苍术、焦苍术水提物药效差异,分别对它们的健脾止泻作用和燥湿作用进行了研究。以大鼠脾虚泄泻模型,考察生、焦苍术健脾止泻作用,结果提示同等剂量下生品的胃残留率、TNF-α高于焦品,小肠推进率、胃动素、胃泌素、IL-10低于焦品;以上结果表明焦品健脾止泻作用强于生品。以大鼠湿阻中焦模型考察生苍术和焦苍术燥湿作用,结果提示同等剂量下尿液中AQP2含量焦品高于生品,结肠粘膜中AQP3含量生品低于焦品;以上结果表明生品苍术的燥湿作用强于焦品,同时也证明了焦品的止泻作用强于生品。以上所得结论与临床实践一致。为明确生、焦苍术挥发油毒性的差异,采用改良寇氏法测定苍术炒焦前后挥发油的半数致死量（LD50）,结果表明生苍术挥发油LD50为2970mg/kg,LD50的95%可信限为2592mg/kg3411mg/kg;焦苍术挥发油LD50为3360mg/kg,LD50的95%可信限为3032mg/kg3717mg/kg。根据化合物经口急性毒性分级标准:生苍术、焦苍术挥发油均为低毒,但焦苍术挥发油毒性LD50比生苍术低,由此表明苍术炒焦之后毒性降低。为明确生苍术、焦苍术化学成分上的差异,分别采用高效液相和气相色谱法对比研究生苍术、焦苍术水提物和挥发油部位的化学成分,结果表明水提物和挥发油部位中含量较高的化学成分在炮制前后含量变化比较显著。上述研究结果为进一步探讨药效与化学成分变化的相关性,分析苍术炒焦作用变化的物质基础,最终阐释焦苍术炮制机理奠定了基础。