大兴安岭地区杜香有效成分的研究

杜香是黑龙江省蓄积量丰富的野生植物资源，国内外的研究资料都表明其具有重要的香料价值和药用价值，本文以生长于大兴安岭地区的杜香为研究对象，建立了高效液相色谱法分析杜香有效成分—香豆素和熊果酸的色谱条件，确定了超临界二氧化碳萃取法提取香豆素和精油最佳条件，确定了超声波提取熊果酸的最佳条件，并用硅胶柱分离法对其进行了分离纯化。研究结果如下： 1．高效液相色谱法分析香豆素含量的色谱条件：ODS柱（25cm×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈：水（体积比40：60）；检测波长：273nm；进样量：10μL；流速：1.0mL／min；柱温：25℃。高效液相色谱法分析熊果酸含量的色谱条件：流动相：甲醇：水（体积比90：10）；检测波长：210nm；其余条件同上。 2．超临界CO2萃取法提取香豆素的最佳条件：萃取温度45℃，萃取压力30Mpa，分离温度55℃，其中萃取压力是影响提取率的主要因素。超临界CO2萃取法的提取率是14.13μg／g，是用乙醇浸提法提取得率（4.26μg／g）的3.32倍。 3．超临界CO2萃取法提取杜香精油的条件是：萃取温度55℃，萃取压力25Mpa，第一分离釜压力8Mpa，分离釜温度35℃。其中分离釜压力是主要影响因素。采用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS），通过标准谱图库检索对萃取物的组分进行分析鉴定，超临界萃取物含有蜡质和脂肪酸等非挥发性杂质。 4．大兴安岭地区杜香不同采集期精油和熊果酸的含量均不同，二者的最高含量均出现在果实成熟的8月份，在生产中其采集期可适当放宽。 5．熊果酸的最佳提取方法是超声提取法，超声提取条件为乙醇浓度95％，超声温度45℃，时间30min，频率40KHz，其中乙醇浓度是主要影响因素。 6．用硅胶柱层析的方法对提取物进行初步分离，洗脱液为氯仿：甲醇（体积比500：1），显色剂为5％的硫酸乙醇溶液，蒸发回收溶剂后得到的浸膏，用95％的乙醇重结晶一次得到纯度为85％的熊果酸粗品。 进一步考察杜香中的有效成分，建立综合利用工艺，提高综合利用率，对于满足当前国际社会对天然药物的需求，充分利用我国丰富的植物资源具有极其重要的意义。