观赏植物马尾杉内生菌及其次生代谢产物对AChE的抑制活性

观赏植物马尾杉属蕨类植物，在自然条件下生于岩壁或附生于树上，其枝叶常向下垂吊生长。因此，该植物常被应用于岩壁绿化、盆栽或悬垂应用，成为园林绿化中不可缺少的植物类群。近年对观赏植物马尾杉的进一步深入研究发现，从该植物中提取到的石杉碱甲是一种高选择性胆碱酯酶抑制剂，对阿尔茨海默病(Alzheimer's Disease，AD)有明显疗效。但由于观赏植物马尾杉生长缓慢，且其石杉碱甲含量甚微，使观赏植物马尾杉的药用开发受到限制。 近年来研究表明，植物内生菌几乎存在于所有目前已研究过的植物中，分布广，种类多，其产生的丰富多样的次生代谢产物，具有多种生物学活性，在农业和医药业中具有重要的应用潜力。 本实验以观赏植物马尾杉为材料，研究了其内生菌的种类分布、组成及其在植物不同器官分布的特点；通过体外实验，筛选出了对乙酰胆碱酯酶有抑制作用的内生菌种，对效果最明显的一株菌种进行了适宜培养条件的探索；并对此菌种产生的活性成分进行了初步分离与检测。结果如下： 1．从观赏植物马尾杉中共分离到分别属于子囊菌，藻菌和半知菌的56种内生真菌，其中子囊菌占73％，藻菌占21％，半知菌占14％；内生菌在观赏植物马尾杉器官中的分布以茎中最多，其次为叶片，假根中最少。 2．共筛选出对乙酰胆碱酯酶有抑制作用的菌种13株，其中珠网霉属K11菌种表现出较强的抑制率，其发酵液的生物碱粗提物对乙酰胆碱酯酶的抑制率与从蛇足石杉(观赏用马尾杉的同科植物)植株提取的总生物碱相当，IC50分别为410μg／L。该菌种生长和乙酰胆碱酯酶抑制物合成最适培养基为马铃薯培养基，适宜培养温度为26℃±1℃，液体震荡培养速度为120rpm以上。在接种量为2mL时，菌种生长适宜培养天数为四天，乙酰胆碱酯酶抑制物合成适宜培养时间为五天以后。 3．TLC、HPLC分析结果表明，珠网霉属K11菌能够在其发酵液中合成石杉碱甲类物质。