D-柠檬烯对酒精性肝损伤大鼠脂质代谢影响的研究

目的研究D-柠檬烯(D-limonene)对酒精性肝损伤大鼠脂质代谢的影响。方法雄性Wistar大鼠70只,随机分为7组。A组为空白对照组,每日给予蒸馏水灌胃,前2周8ml/(kg·d),后4周12ml/(kg·d)。B组为酒精模型组,每日给予乙醇灌胃,前2周8ml/(kg·d),后4周12ml/(kg·d),乙醇体积分数为50%。C、D、E组分别为D-柠檬烯低、中、高剂量干预组,每日分别给予D-柠檬烯100、200、400mg/(kg·d)灌胃。F组为水和D-柠檬烯空白单独高剂量组,每日给予D-柠檬烯400mg/(kg·d)。G组为甘利欣药物对照组,每日给予甘利欣200mg/(kg·d)灌胃。C、D、E、G组乙醇剂量同模型组,F组蒸馏水剂量同空白对照组。试验进行6周。末次灌胃禁食12 h后,水合氯醛麻醉,腹主动脉取血,分离血清,留取肝组织。HE染色法观察肝组织形态结构;电镜观察肝组织超微结构的变化。计算各组大鼠肝指数,研究D-柠檬烯对酒精性肝损伤大鼠肝指数的影响。检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平。结果HE染色病理观察结果显示,D-柠檬烯低中高剂量组肝细胞脂肪变性呈现不同程度改善,炎细胞浸润减少,中、高剂量D-柠檬烯干预组与酒精模型组相比,肝细胞排列更整齐,以中央静脉为中心向四周呈放射状整齐排列,组织结构趋于正常。电镜下观察到D-柠檬烯低中高剂量组肝细胞结构趋于正常,细胞核呈圆形或椭圆形,核膜较为清晰完整,线粒体、高尔基体、胆小管等较为清晰,脂滴数减少。研究发现大量的酒精摄入使大鼠体重明显下降,且肝/体比值显著升高。这些变化可能与酒精的毒性以及其影响营养素的消化吸收有关。与之相反的是,D-柠檬烯的干预可有效抑制酒精诱导的体重减轻和肝脏指数的变化。B组大鼠血清ALT、AST、ALP、Ch E、TG、CHO、LDL分别为72.00±7.30、118.62±13.00、130.75±9.14、127.62±21.10、0.93±0.03、2.15±0.18、0.25±0.04均高于空白对照组的水平,差异具有统计学意义(P<0.05);F组大鼠血清ALT、AST、ALP、Ch E、TG、CHO、LDL与空白对照组无明显差异;而不同剂量的D-柠檬烯干预组和酒精模型对照组比较,血清ALT、AST、ALP、Ch E、TG、CHO、LDL水平均有不同程度地降低,其中D-柠檬烯中、高剂量干预组血清ALT、AST、ALP、Ch E、TG、CHO、LDL水平分别为57.12±2.99、100.38±6.59、104.88±10.38、100.75±7.97、0.72±0.03、1.81±0.06、0.17±0.03和57.00±5.34、98.75±5.72、97.75±10.44、94.00±11.18、0.64±0.04、1.56±0.23、0.16±0.04明显低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论D-柠檬烯可降低因酒精暴露而引起的大鼠血清ALT、AST、ALP、Ch E增高,降低大鼠TG、CHO、LDL水平,改善肝组织超微结构的病理损伤,对酒精造成的脂质代谢紊乱有一定的调节作用。