研究目的:观察参苓白术散对高脂喂养小鼠胰腺内、外分泌功能的影响。研究方法:将小鼠适应喂养1周后,随机分为正常组和高脂组,正常组小鼠和高脂组小鼠分别给与普通饲料、高脂饲料饲养;两周后再将高脂组小鼠按照随机数字表的方法分为模型组和参苓白术散组(参苓组),正常组和模型组小鼠给予生理盐水灌胃,参苓组小鼠给予参苓白术散(28g/kg)灌胃,期间每周测定小鼠的体重、血糖。14周后,行腹腔注射葡萄糖耐量实验(IPGTT)和胰岛素耐量实验(IPITT)。于实验的第16周应用代谢笼检测小鼠的能量代谢,观察24小时能量代谢的相关指标(包括小鼠24h的摄食量、氧气消耗量、二氧化碳呼出量、呼吸商以及能量消耗量)。实验结束后收取血浆,通过ELISA方法检测胰岛素、胰高血糖素、生长抑素、胰多肽水平;通过生化方法检测血浆甘油三脂、胆固醇、低密度脂蛋白(LDL-C)、游离脂肪酸(FFA)以及胰腺淀粉酶、胰脂肪酶水平及胰腺组织甘油三酯、胆固醇和游离脂肪酸含量。通过Western blot、免疫荧光检测蛋白质表达,RT-PCR检测mRNA表达,检测指标包括:胰岛素、生长抑素、胰多肽、NF-κB、IL-6、TNF-α等。研究结果:(1)体重和血糖:和正常组相比,模型组小鼠体重、血糖异常增高,参苓白术散能够显著降低高脂诱导的体重和血糖升高。(2)能量代谢:模型组小鼠的摄食量较正常组明显减少,模型组小鼠的呼吸商较正常组降低,表明模型组小鼠主要以消耗脂质进行代谢,且能量消耗较正常组降低。参苓组白术散有增加摄食量以及能量代谢的趋势。(3)IPITT和TPGTT实验以及血浆脂质水平:模型组较正常组小鼠的胰岛素敏感性和葡萄糖耐量降低,胆固醇水平以及低密度脂蛋白水平(LDL-C)、游离脂肪酸水平(FFA)较正常组升高,和模型组比较,参苓组有降低血浆脂质水平的趋势以及改善葡萄糖耐量和胰岛素敏感性,改善脂质和糖代谢。(4)胰腺组织脂质浸润:HE染色和油红O染色结果显示模型组小鼠胰腺腺泡细胞、胰岛细胞以及小叶间组织和正常组相比有较多的脂肪空泡,胰腺组织上清的甘油三脂和胆固醇以及游离脂肪酸含量较正常组升高,参苓组能够降低胰腺组织中的甘油三酯以及游离脂肪酸水平,减轻胰腺脂肪浸润。(5)胰腺组织炎症:模型组小鼠的IL-6、TNF-a的mRNA水平较正常组有增加的趋势,参苓组有降低IL-6、TNF-a的mRNA水平的趋势;模型组小鼠的NF-κB蛋白表达水平较正常组增加,参苓组能够降低NF-κB蛋白的表达。(6)胰腺内分泌:模型组小鼠血浆中的胰岛素含量较正常组增加,胰腺组织的βcell mass(BCM)较正常组有增加的趋势,参苳白术散有降低血浆中胰岛素含量以及胰腺组织的β cell mass(BCM)的趋势;模型组小鼠的血浆中的胰高血糖素含量较正常组有增多的趋势,参苓白术散有降低血浆中胰高血糖素含量的趋势。模型组小鼠的血浆和胰腺组织中的生长抑素含量和正常组没有明显区别,参苓白术散可以增加生长抑素含量;模型组小鼠血浆和胰腺组织中的胰多肽较正常组增加,参苓白术散能够增加高脂喂养小鼠血浆和胰腺组织中的胰多肽含量。(7)胰腺外分泌:模型组小鼠胰腺淀粉酶肪酶水平较正常组小鼠降低,胰脂肪酶较正常组有下降的趋势,但组内差异大,没有统计学意义,参苓组有增加胰腺淀粉酶和胰腺脂肪酶分泌的趋势。研究结论:长期高脂饮食的小鼠胰腺存在一定程度的脂肪异位沉积,使得胰腺的内分泌功能和外分泌功能受到损害,参苓白术散作为健脾化湿的代表方剂对于高脂造成的上述损害有保护作用,这种保护作用可能基于胰腺脂肪沉积的改善以及减轻胰腺组织的炎症有关。
