金柑(Fortunella margarita (Lour.) Swingle)属芸香科常绿灌木或小乔木植物。根据李时珍《本草纲目》记载,金桔“酸、温、甘、无毒”,食用金柑“同补药则补,同泻药则泻,同升药则升,同降药则降”,能醒酒疏肝。目前有关金柑解酒护肝功效及其利用研究报道较少。因此,本文以浏阳金柑为材料,对金柑不同提取液进行了解酒护肝的体外活性试验,并在优化了金柑总黄酮的提取及分离纯化工艺基础上,进行了金柑总黄酮解酒保肝的动物学试验。主要研究结果如下:
1.金柑不同提取液解酒护肝的体外活性试验中,比较了不同剂量和不同组分的金柑提取液对乙醇脱氢酶(ADH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性影响。结果表明:80%乙醇提取液效果最好,水提取液效果次之,并且随着乙醇提取液剂量的增加,影响效果明显增加。比较了金柑不同提取液中总黄酮含量及干物质含量。金柑80%乙醇提取液的总黄酮含量最高(0.400mg/mL),水提取液次之;干物质含量以水提取液中最高,80%的乙醇提取液次之,而总黄酮含量占干物质的比例是以80%乙醇提取液最高(4.99%),水提液次之。因此,推测金柑中具有解酒保肝功效的组分可能是金柑中黄酮类化合物。
2.金柑总黄酮超声波提取工艺优化研究中,确定其最佳组合为B2A2D2C1,即提取温度为50℃,乙醇浓度为70%,料液比为1:50,提取时间为50min。通过静态吸附解吸试验,优选D-101树脂,优化D101分离纯化金柑总黄酮工艺,并确定其最佳组合为A2D2B3C1,即上柱液pH值为4.0,洗脱液体积分数为70%乙醇,上柱液浓度为2.5mg/mL,流速为0.5BV。
3.急性酒精中毒小鼠醒酒作用试验中,高、低剂量组均明显缩短小鼠醒酒时间,说明金柑总黄酮具有显著解酒促醒作用。与模型组比较,阳性对照组和高、低剂量组小鼠自主活动明显减少,说明金柑总黄酮对酒精的兴奋作用有拮抗作用。与模型组比较,金柑总黄酮高、低剂量组小鼠ADH活性明显提高,说明金柑总黄酮可以提高ADH活性,促进乙醇代谢。与模型组比较,金柑总黄酮高、低剂量组对小鼠SOD、 GSH-Px活性具有明显促进作用,高剂量组对MDA生成抑制效果明显。说明金柑总黄酮具有调节自由基代谢,抗氧化损伤,保护急性酒精中毒小鼠肝脏的作用。