附子、川乌、草乌、草乌叶时间、剂量与药效的相关性研究

目的:研究附子、川乌、草乌和草乌叶煎煮时间、给药剂量与药效的相关性,确定药物发挥功效的最佳煎煮时间和给药剂量,探讨附子抗免疫佐剂性关节炎的作用机制。 方法:根据附子(生附子、白附片、黑附片)、川乌(生川乌、制川乌)、草乌(生草乌、制草乌)、草乌叶的功能主治,选择心衰、阳虚便秘、肾阳虚、痛证、炎症、热证等动物模型,应用均匀设计和回归分析方法,确定药物不同功效的最佳煎煮时间和最佳给药剂量。采用蛋白质组学的方法,运用蛋白质芯片技术,研究附子对免疫佐剂性关节炎模型大鼠血清细胞因子IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6L、IL-10、γ-IFN、GM-CSF、TNF-α等的影响。 结果: 1、附子能明显增加心阳虚衰大鼠心率,升高左室内压最大上升速率,降低左室内压最大下降速率;明显改善肾阳虚动物一般状态,升高体温,恢复体温昼夜节律性,显著延长肾阳虚动物低温游泳衰竭时间和爬杆时间;明显改善阳虚便秘小鼠的阳虚便秘症状,显著缩短排便潜伏期,增加排便颗粒数,明显促进胃肠蠕动,提高胃肠推进率。附子能明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀;显著对抗蛋清所致大鼠足跖肿胀;抑制巴豆油所致大鼠炎性肉芽肿的增生,减少炎性渗出液。附子能显著减少醋酸所致小鼠扭体次数,延长小鼠扭体潜伏期;明显延长热板刺激小鼠添足潜伏期,提高热板小鼠痛阈值。附子发挥温心阳作用的最佳煎煮时间为6小时,最佳给药剂量为12g/kg;温肾阳作用的最佳煎煮时间为6小时,最佳给药剂量为12g/kg;温阳通便的最佳煎煮时间为6小时,最佳给药剂量为12g/kg。抗炎功效的最佳煎煮时间为0.25小时,最佳给药剂量为12g/kg。镇痛功效的最佳煎煮时间为0.25小时,最佳给药剂量为12g/kg。 2、川乌能明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀:显著对抗蛋清所致大鼠足跖肿胀;能抑制巴豆油所致大鼠炎性肉芽肿的增生,减少炎性渗出。川乌能显著减少醋酸所致小鼠扭体次数,延长小鼠扭体潜伏期:明显延长热板刺激小鼠添足潜伏期,提高热板小鼠痛阈值。川乌抑制小鼠耳廓肿胀的最佳煎煮时间为6h,最佳给药剂量为2.4g/kg(48倍);抑制大鼠蛋清足跖肿胀的最佳煎煮时间和给药剂量6h2.4g/kg(48倍);对抗巴豆油肉芽肿炎性渗出和肉芽增生的最佳煎煮时间和剂量为6h,2.4g/kg(48倍)。抑制小鼠醋酸扭体疼痛的最佳煎煮时间为6小时,最佳给药剂量为2.4g/kg(48倍);提高小鼠热板痛阈的最佳煎煮时间和给药剂量为6小时2.4g/kg(48倍)。