基于血浆代谢组学的脾气虚证本质研究

目的:脾为“气血生化之源”、“后天之本”,祖国医学归纳脾的功能为“主运化、主统血、主肌肉四肢”,因此,脾虚会引起气血生化无源、运化失职必然会影响到多脏代谢的变化。脾气虚证是中医临床较为常见的一种证型,是由于脾气不足,运化失职所表现的虚弱证候,可以发生在不同系统、不同疾病的发展过程中,是许多疾病的病因病机,正如“百病皆脾胃衰而生也”。代谢综合征(metabolic syndrome,MS)是以中心性肥胖为中心,包括多种代谢紊乱,这些代谢紊乱之间关系密切而复杂,是高血压、糖尿病、冠心病和脑卒中等多种疾病的基础。痰湿是肥胖的重要病理因素,而MS又以肥胖为中心,所以痰湿是MS证候群的中心病理因素。脾虚失运,以致体内气血及津液输布、运化失常,形成痰湿、瘀血等一系列病理产物,困阻于体内,故MS的重要病机之一为脾虚痰湿。所以本研究拟选取代谢综合征患者为对象进行脾气虚证的代谢本质研究。代谢组学是继基因组学、转录组学和蛋白质组学之后新近发展起来的,是研究生物体系所有代谢产物及代谢途径变化规律的一门新兴科学,它的整体反应性特征与中医学的整体观、系统观和辨证论治思维非常吻合,所以代谢组学在中医方面的应用越来越广泛。 将中医的辨病、辨证与代谢组学方法相结合,分析脾气虚患者血浆中小分子代谢组成分,揭示脾气虚证的代谢机制,尝试对中医脾虚“证”的诊断或评价指标进行定性、定量的表达;期待发现脾气虚代谢综合征患者血浆标本代谢物图谱呈现出不同于正常健康人的分布图谱;期待发现几种化合物,可以成为揭示脾气虚本质的生物标志物,从而进一步揭示中医脾气虚本质。 方法: 1.收集研究对象的基本资料(腰围、血压、血脂和血糖等),结合代谢综合征、脾气虚证的诊断标准将符合纳入标准的对象分为正常对照组、代谢综合征组和脾气虚代谢综合征组三组。 2.运用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术(ultra high performance liquid chromatography–quadrupole– time of flight mass spec- trometry,UPLC–Q–TOF-MS)鉴定表达差异的血浆代谢产物;采用偏最小二乘法判别分析(partial least square discrimination analysis,PLS-DA)进行数据处理。 结果: 1.通过PLS-DA可以将三组血浆代谢产物很好的区分,各组血浆主成分的积分值集中分布于椭圆形散点图(95%置信区内)区域内,正常对照组、代谢综合征组和脾气虚代谢综合征组无明显的交叉和重叠。 2.与正常对照组相比,代谢综合征组血浆中lysoPC C16:0(溶血磷脂酰胆碱C16:0)、GPCho(32:2)(甘油磷脂酰胆碱32:2)、GPCho(32:1)(甘油磷脂酰胆碱32:1)的峰高是升高的。 3.与代谢综合征组相比,脾气虚代谢综合征组血浆中carnitine C8:0(肉碱C8:0)、GPCho(38:6)(甘油磷脂酰胆碱38:6)和分子量为341.282的未知化合物的峰高是下降的。 结论: 1.本研究通过代谢组学观察到脾气虚代谢综合征患者血浆标本代谢物图谱呈现出不同于正常健康人的分布图谱。 2.代谢综合征可能存在磷脂代谢的紊乱,其中lysoPC C16:0、GPCho (32:2)、GPCho(32:1)可能为代谢综合征的潜在标志物。 3.carnitine C8:0、GPCho(38:6)和分子量为341.282的未知化合物可能为脾气虚证的潜在标志物。