代谢综合征(metabolic syndrome,MS)是一组伴有中心性肥胖、高血脂、高血压、糖尿病或空腹血糖增高的证候群。中医药采用整体观和个体化治疗相结合的方法在防治代谢综合征方面取得了显著疗效。现代医学对代谢综合征病因病机的认识还有待进一步深入研究,而检验中医药治疗代谢综合征临床疗效也需要有效的动物实验技术支持,故而构建符合临床特征的代谢综合征病证结合动物模型成为研究这一问题的有效实验手段。现有的MS动物模型多以饮食诱导叠加药物诱导或直接选择基因缺陷类动物造模,模型往往只体现出单一病种的特点,与实际人类患病因素和杂食性饮食习惯还有一定的差距。前人对MS模型的研究往往更关注模型的成模率,而对其病理生理演变特点没有相关研究。病证结合动物模型作为一种新的理论创新,其规范化和标准化方面还有很多理论和技术问题需要逐步解决。基于此,本课题以代谢综合征病证结合动物模型为研究对象,尝试建立与临床特征相似的比较完整的代谢综合征病证结合动物模型评价体系并探索MS证候演变规律。1高脂高糖高盐饮食诱导的C57小鼠代谢综合征模型的初步探索C57小鼠20只,按体重随机分为正常组与模型组,每组10只,正常组给予全价营养饲料,模型组给予高脂高糖高盐饲料,造模4周。每周称取小鼠体重并于4周后检测血压、血糖、抓力、脉搏。实验结果显示模型组与正常组相比,体重、血糖、血压、抓力及脉搏无显著差异。根据实验结果分析,此种配方饲料未能在持续4周实验后造模成功。提示更换配方饲料,调整实验方案。2高脂高糖高盐饮食诱导的代谢综合征大鼠模型配方饲料筛选根据啮齿类动物的饮食特点及造模需求选取两种新型配方饲料a、b,分别持续4周给予造模组Wistar大鼠,4周后,与给予基础饲料的正常组大鼠进行各项检测指标比较,筛选可用于饮食诱导代谢综合征模型的高脂高糖高盐配方饲料。结果显示给予配方饲料a的大鼠体重较正常组无明显差异,给予配方饲料b的大鼠体重较正常组显著升高。结果说明配方饲料b适用于高脂高糖高盐饮食诱导的代谢综合征病证结合动物模型造模。3高脂高糖高盐饮食诱导的代谢综合征病证结合大鼠模型的探索性研究4周龄Wistar大鼠随机分为正常组和模型组(每组24只),分别给予普通饲料和高脂高糖高盐饮食。每2周检测体重、饮食饮水量及行为学特征并分别于第4,8,12周各处死8只大鼠取材,动态检测造模过程中大鼠体重、血糖、血压、血脂、肝脏病理组织、内脏脂肪系数、lee's指数及中医证候指标。4周后,模型组体重高于正常组(P<0.05)、肝脏病理组织切片中可见轻度脂肪肝样变化;8周后,模型组体重及lee's指数、肾周脂肪系数、血清总胆固醇(TC)较正常组显著升高(P<0.01),低密度脂蛋白(LDL)与睾丸周脂肪系数较正常组升高(p<0.05),脂肪肝样病变加重;12周后,模型组较正常组血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、肾及睾丸周脂肪系数显著升高(P<0.01),lee's指数与体重升高(p<0.05),高密度脂蛋白(HDL)降低(P<0.05),肝脏病理组织切片中可见中度脂肪肝样病变。4周时,模型组较正常组出现旷场活动减少、心率升高、游泳耐力、呼吸频率、脉搏频率、脉搏幅度降低并持续此种变化直至12周实验结束(P<0.05)。动态观察结果显示大鼠MS样症状随时间延长而呈现加重趋势,大鼠动物模型首先出现腹型肥胖体征,其次出现血脂紊乱及脂肪肝样病变。中医证候学指标显示4周时大鼠形成脾气虚模型;8周时,大鼠出现痰湿壅盛证模型(较轻);12周时,大鼠出现痰湿壅盛证模型(较重)。4代谢综合征方对代谢综合征脾气虚模型的药效评价分别采用三种不同工艺提取代谢综合征方(黄芪30g女贞子12g黄连5g瓜萎9g等),大鼠灌胃给药4周,进行药效学评价。4周后,给药组与模型组在体重、睾丸周脂肪系数、旷场活动时间、脉搏幅度及游泳耐力方面有显著差异。代谢综合征方对大鼠脾气虚模型有改善作用,同时也反证了高脂高糖高盐饮食诱导的大鼠脾气虚型代谢综合征模型的科学性。综上所述,本课题通过对造模方法、动物品系、饲料配方、药物反证、检测指标的筛选和优化,初步揭示出高脂高糖高盐饮食诱导的代谢综合征病证结合动物模型的转变规律。
