大黄蟅虫丸对胰岛素抵抗大鼠脂联素、瘦素及其受体mRNA表达的影响

目的:观察胰岛素抵抗(Insulin Resistance, IR)大鼠血清脂联素、瘦素水平及肝脏中脂联素受体mRNA、瘦素受体mRNA表达,研究大黄　虫丸对IR的防治作用及其机制。IR是导致包括肥胖症、糖尿病、高血压病等一系列病理状态在内的代谢综合征的共同危险因素。脂肪细胞不仅仅是能量储备的器官,而且也是分泌各种细胞因子的内分泌器官,在代谢、能量平衡等方面起着重要的作用。多数脂肪因子均为心血管危险因子和导致IR的重要成分。众多细胞因子,对IR有很多影响,一些可阻止IR的发生,而另一些却促进IR的形成。前者如脂联素(Adiponection,APN),后者如瘦素(Leptin,LP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、抵抗素(resistin)。 大黄　虫丸出自汉代著名医家张仲景所著《金匮要略·血痹虚劳病脉症并治第六》,由大黄、黄芩、甘草、桃仁、苦杏仁、芍药、生地黄、干漆、虻虫、水蛭、蛴螬、　虫组成,具有活血化瘀散结、缓中补虚之功效。 本实验采用高脂饲料喂养大鼠,建立IR大鼠模型,给予大黄　虫丸低、高剂量、血脂康灌饲,观察了血脂、血糖、胰岛素、脂联素、瘦素等指标及肝脏中脂联素受体(adiponectin receptor 2, AdipoR2)mRNA、瘦素受体(leptin receptor,OB-R)mRNA表达,研究脂联素、瘦素及其受体mRNA与IR的关系,进一步探讨大黄　虫丸对IR的预防作用及作用机制,为临床研发改善IR新药物提供理论依据。 方法:选用健康清洁级雄性Wistar大鼠50只,体重180g-200g,适应性喂养1周,逐一称重按重量标号,随机分为5组:空白对照组(A组)10只、模型组(B组)10只、大黄　虫丸低剂量组(C组)10只、大黄　虫丸高剂量组(D组)10只、血脂康组(E组)10只。空白对照组采用普通饲料喂养;其余4组采用高脂饲料(高脂饲料由87.6%普通饲料、2%的胆固醇、0.2%的胆酸钠、0.2%的丙基硫氧嘧啶和10%的猪油组成)喂养。空白对照组(A组)给予蒸馏水10ml/Kg灌胃、模型组(B组)给予蒸馏水10ml/Kg灌胃、大黄　虫丸低剂量组(C组)给予大黄　虫丸1g生药/Kg灌胃、大黄　虫丸高剂量组(D组)给予大黄　虫丸2g生药/Kg灌胃、血脂康组(E组)给予血脂康0.2 g/Kg灌胃,连续喂养给药8周。实验每周测量大鼠体重。末次给药后,禁食12小时,断头取血,迅速离心,留取血清、血浆标本,-4℃保存,待用于生化指标及血清脂联素血清瘦素检测。迅速切取部分肝脏组织,液氮保存,待RT-PCR法测定脂联素受体(AdipoR2)mRNA、瘦素受体(OB-R)mRNA。 结果:1大黄　虫丸对空腹血糖(Glu)、空腹胰岛素(INS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感指数(ISI)的影响 模型组与空白对照组(4.64±0.62;37.11±6.39;7.76±2.03;0.006±0.002)相比,大鼠Glu(5.53±0.40)、INS(69.24±14.73)、HOMA-IR(16.97±3.53)均明显升高(P<0.01),而ISI(0.003±0.001)明显降低(P<0.05);大黄　虫丸低、高剂量组与模型组(5.53±0.40; 69.24±14.73; 16.97±3.53; 0.003±0.001)相比,大鼠Glu(4.67±0.43;4.34±0.40)、INS(37.10±11.10;36.08±7.38)、HOMA-IR(7.81±2.96;7.01±1.82)均明显降低(P<0.01) ,而ISI(0.006±0.002;0.007±0.002)明显升高(P<0.01);大黄　虫丸高剂量组与大黄　虫丸低剂量组相比,高剂量组大鼠Glu、INS、HOMA-IR降低,ISI升高,有优于低剂量组的趋势,但无统计学意义(P>0.05);大黄　虫丸低、高剂量组与血脂康组相比,大黄　虫丸高剂量组大鼠Glu明显降低(P<0.05), HOMA-IR降低,ISI升高,有优于血脂康组(4.97±0.44;33.79±7.03;7.53±2.06;0.006±0.001)的趋势,但无统计学意义(P>0.05)。 2大黄　虫丸对血脂的影响 模型组与空白对照组(0.59±0.13;5.99±0.81;1.63±0.12;1.57±0.32)相比,大鼠TG(1.89±0.47)、TC(7.69±0.14)、LDL-C(2.14±0.11)均明显升高(P<0.05),而HDL-C(0.31±0.04)明显降低(P<0.01);大黄　虫丸低、高剂量组与模型组相比,大鼠TG(0.53±0.14;0.47±0.17)、TC(5.47±0.58;5.41±1.12)、LDL-C(1.50±0.30;1.45±0.14)均明显降低(P<0.05),而HDL-C(1.40±0.45;1.33±0.17)明显升高(P<0.01);大黄　虫丸高剂量组与大黄　虫丸低剂量组相比,大鼠TG、TC、LDL-C降低,有优于低剂量组的趋势,但无统计学意义(P>0.05),而大黄　虫丸低剂量组大鼠HDL-C升高,有优于高剂量组的趋势,但无统计学意义(P>0.05);大黄　虫丸低、高剂量组与血脂康组相比,大鼠TC(5.47±0.58;5.41±1.12)、TG(0.53±0.14;0.47±0.17)、LDL-C(1.50±0.30;1.45±0.14)降低,有优于血脂康组(0.56±0.55;6.42±0.63;1.51±0.12;1.77±0.55)的趋势,但无统计学意义(P>0.05)。 3大黄　虫丸对大鼠血清脂联素(APN)水平的影响 模型组与空白对照组(7.86±1.40)相比,大鼠APN(3.59±0.98)明显降低(P<0.01);大黄　虫丸低、高剂量组与模型组(3.59±0.98)相比,大黄　虫丸高剂量组大鼠APN(5.56±1.53)明显升高(P<0.05),而大黄　虫丸低剂量组大鼠APN(4.83±1.69)升高,有优于模型组趋势,但无统计学意义(P>0.05);大黄　虫丸高剂量组与大黄　虫丸低剂量组相比,高剂量组APN(5.56±1.53)升高,有优于低剂量组(4.83±1.69)的趋势,但无统计学意义(P>0.05);大黄　虫丸低、高剂量组与血脂康组相比,大黄　虫丸高剂量组APN(5.56±1.53)升高,有优于血脂康组(5.52±0.96)的趋势,但均无统计学意义(P>0.05)。 4大黄　虫丸对大鼠血清瘦素(LP)水平的影响 模型组与空白对照组(0.51±0.18)相比,LP(0.77±0.13)明显升高(P<0.01);大黄　虫丸低、高剂量组与模型组(0.77±0.13)相比,大黄　虫丸低、高剂量组大鼠LP(0.33±0.06;0.35±0.18)均明显降低(P<0.01);大黄　虫丸高剂量组与大黄　虫丸低剂量组相比,低剂量组LP(0.33±0.06)降低,有优于高剂量组(0.35±0.18)的趋势,但无统计学意义(P>0.05);大黄　虫丸低、高剂量组与血脂康组相比,大黄　虫丸低、高剂量组LP(0.33±0.06;0.35±0.18)降低,有优于血脂康组(0.36±0.16)的趋势,但均无统计学意义(P>0.05)。 5大黄　虫丸对大鼠肝脏中脂联素受体(AdipoR2)mRNA表达的影响 模型组与空白对照组(0.93±0.07)相比,大鼠AdipoR2 mRNA(0.45±0.16)表达明显降低(P<0.01);大黄　虫丸低、高剂量组与模型组(0.45±0.16)相比,大黄　虫丸低、高剂量组大鼠AdipoR2mRNA(0.73±0.10;0.89±0.13)表达均明显升高(P<0.05);大黄　虫丸高剂量组与大黄　虫丸低剂量组相比,大鼠AdipoR2mRNA(0.89±0.13)表达升高,有优于低剂量组(0.73±0.10)的趋势,但无统计学意义(P>0.05);大黄　虫丸低、高剂量组与血脂康组相比,大黄　虫丸高剂量组大鼠AdipoR2mRNA(0.89±0.13)表达升高,有优于血脂康组(0.78±0.19)的趋势,但均无统计学意义(P>0.05)。 6大黄　虫丸对大鼠肝脏中瘦素受体(OB-R)mRNA表达的影响模型组与空白对照组(0.71±0.17)相比,大鼠OB-R mRNA(0.30±0.08)表达明显降低(P<0.01);大黄　虫丸低、高剂量组与模型组(0.30±0.08)相比,大黄　虫丸高剂量组大鼠OB-R mRNA(0.66±0.14)表达明显升高(P<0.01),大黄　虫低剂量组大鼠OB-R mRNA(0.52±0.04)表达升高,有优于模型组(0.30±0.08)趋势,但无统计学意义(P>0.05);大黄　虫丸高剂量组与大黄　虫丸低剂量组相比,大鼠OB-RmRNA(0.66±0.14)表达升高,有优于低剂量组(0.52±0.04)的趋势,但无统计学意义(P>0.05);大黄　虫丸低、高剂量组与血脂康组相比,大黄　虫丸高剂量组大鼠OB-R mRNA(0.66±0.14)表达升高,有优于血脂康组(0.58±0.14)的趋势,但均无统计学意义(P>0.05)。 结论:1高脂饲料喂养大鼠,成功建立IR动物模型,表明IR与血脂异常存在着密切的关系。 2大黄　虫丸可提高IR大鼠胰岛素敏感性,防治IR。 3大黄　虫丸可升高IR大鼠血清脂联素水平。 4大黄　虫丸可降低IR大鼠血清瘦素水平。 5大黄　虫丸可上调IR大鼠肝脏脂联素受体(AdipoR2)mRNA的表达。 6大黄　虫丸可上调IR大鼠肝脏瘦素受体(OB-R)mRNA的表达。