参芍怡脑方抗血管性痴呆有效物质基础研究

参芍怡脑方是中医治疗脑血管疾病的经验方，由赤芍、葛根、人参三味中药组成，功效为益气、活血、健脑。临床主治血管性痴呆（vascular dementia, VD）。主要药效研究显示：参芍怡脑方的有效部位具有较其方剂更强的抗脑缺血作用，能较好地保护缺血性脑损伤，具有健脑益智，抗脑衰之功效。 第一部分 文献综述研究 对中药复方(整方)化学研究现状进行综述；对近5年来有关参芍怡脑方组成各单味药的化学成分和药理学研究进展进行综述，共引文献97篇。 第二部分 参芍怡脑方抗血管性痴呆有效部位的实验研究 1.对参芍怡脑方抗血管性痴呆有效部位进行提取、分离，得到10个单体化合物，运用各种色谱、光谱技术或化学方法鉴定了其中的8个。其中异黄酮1个，为大豆素；异黄酮苷6个，分别是葛根素、3′-甲氧基葛根素、葛根素芹糖苷、染料木苷、4′-甲氧基大豆苷、4′，7-二葡萄糖大豆素；蒎烷单萜苷1个，为芍药苷。此8个化合物均为首次从参芍怡脑方中得到，经文献检索知大豆素、葛根素、3′-甲氧基葛根素、葛根素芹糖苷、染料木苷、4′-甲氧基大豆苷、4′，7-二葡萄糖大豆素均来源于葛根，芍药苷来源于赤芍。 2.建立了参芍怡脑方抗血管性痴呆有效部位的高效液相特征图谱，通过分析比较确定了有效部位的28个色谱峰，通过全方图谱与单味药人参、赤芍、葛根相应部位图谱以及缺人参、缺赤芍、缺葛根阴性图谱的比较，基本确认了各个色谱峰的归属，并通过对照品加入法，确认了10个化合物的对应色谱峰，分别为2号峰（4′、7-二葡萄糖大豆素），4号峰（葛根素），5号峰（3′-甲氧基葛根素），6号峰（芍药苷），9号峰（葛根素芹糖苷），14号峰（4′-甲氧基大豆苷），15号峰（人参皂苷Rg1、Re），17号峰（大豆素），19号峰（人参皂苷Rb1）。 3.采用分光光度法对参芍怡脑方抗血管性痴呆有效部位的总皂苷进行了定量分析，并就香草醛-高氯酸显色反应对方中各单味药的显色情况进行了考察，对各单味药相应部位对总皂苷含量的贡献进行了分析。结果：人参皂苷Rg1标准曲线为 y=4.5931x-0.3137，r=0.9995，表明人参皂苷Rg1在0.072-0.360 mg之间与吸光度呈良好的线性关系，测得全方有效部位总皂苷含量为16.9%，RSD为0.59%。单味人参相应部位总皂苷含量为41.1%，单味赤芍相应部位总皂苷含量为35.9%，计算得人参、赤芍对全方总皂苷含量的贡献分别为4.8%、12.1%。建立了参芍怡脑方抗血管性痴呆有效部位中的主要指标性成分葛根素、芍药苷、大豆素的定量分析方法：葛根素标准曲线为y = 4E+06x - 42320，r = 0.9996（n=6）， 表明葛根素在0.4-2.4μg范围内与其色谱峰峰面积呈良好的线性关系，测得全方有效部位中葛根素的含量为18.38%，RSD为0.21%，加样回收率为103.4%，RSD为1.16%；芍药苷标准曲线为y = 1E+06x + 6269.4，r = 0.9996（n=5），表明芍药苷在0.171-0.855μg范围内与其色谱峰峰面积呈良好的线性关系，测得芍药苷的含量为11.94%，RSD为0.78%，加样回收率为96.9%，RSD为2.39%；大豆素标准曲线为y = 7E+06x - 6654.6，r = 0.9997（n=5），表明大豆素在0.17-0.85μg范围内与其色谱峰峰面积呈良好的线性关系，测得大豆素的含量为2.19%，RSD为0.69%，加样回收率为101.3%，RSD为2.04%。 第三部分 对各实验结果进行分析讨论