目的:以麻黄汤煮散主要有效成分含量为指标,优化麻黄汤煮散制备工艺,确定麻黄汤煮散的最佳煎煮条件。确定煮散临床推荐使用剂量。将麻黄汤饮片汤剂与煮散进行动物药效学比较研究,验证煮散是否与饮片汤剂药效一致,为临床应用提供科学依据。方法:(1)查阅麻黄汤煮散相关资料,进行处方研究,确定其主要有效成分。(2)建立麻黄汤主要有效成分含量测定方法,并对麻黄汤饮片汤剂进行含量测定。(3)以麻黄汤煮散主要有效成分的含量为考核指标,采用单因素法及正交试验多因素法,对麻黄汤煮散制备、煎煮工艺进行优化研究。(4)麻黄汤饮片汤剂和煮散药效学比较研究:(1)观察饮片汤剂和煮散对由干酵母混悬液致大鼠发热模型的影响,比较解热作用。(2)采用贯序法比较饮片汤剂和煮散对由浓氨水刺激引咳小鼠模型的抑制作用。(3)观察饮片汤剂和煮散对由二甲苯致小鼠耳廓肿胀炎症模型和对角叉菜胶致小鼠足趾肿胀炎症模型的影响,比较抗炎作用。结果:(1)处方研究结果:确定盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷为麻黄汤煮散主要有效成分。(2)建立了HPLC法测定麻黄煮散中主要有效成分盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷含量的方法:流动相为甲醇-0.1%磷酸0min-6:94-50min(10:90)-75min(10:90)-75min(6:90);流速1ml/min;检测波长为215nm;柱温为25°C;进样量为20μL;后运行10min。理论塔板数,按盐酸麻黄碱计算,不低于3000,按苦杏仁苷计算,不低于7000。(3)确定了麻黄汤煮散最佳制备工艺:粉碎,过50目筛,装入无纺布袋。确定了麻黄煮散最佳煎煮工艺:取相当于麻黄汤饮片药材的1/2剂量的麻黄汤煮散,装入无纺布袋,加15倍量水,沸腾9min,煎提1次,过滤,浓缩至50ml。确定煮散临床推荐使用为饮片剂量的一半,即12g。(4)饮片汤剂与煮散药效学比较:(1)解热实验:煮散高剂量组、煮散中剂量组、煮散剂低剂量组与饮片汤剂组解热作用比较,差异均无统计学意义(P>0.05),说明传统饮片汤剂与煮散解热作用无显著差别。与空白组比较,有显著差异(p<0.01)。说明煮散与饮片汤剂解热作用显著。(2)止咳实验:煮散高剂量组R值为158.6%,有显著止咳作用;煮散中剂量组R值为144.5%,有止咳作用;煮散剂低剂量组R为123.1%,止咳作用不明显。传统汤剂组R为138.0%,有止咳作用。(3)抗炎实验:煮散中剂量组、煮散剂低剂量组与饮片汤剂组小鼠耳廓肿胀抑制率比较,差异均无统计学意义(P>0.05),煮散高剂量组与饮片汤剂组比较,差异有显著性(P<0.05),与模型组比较差异有极显著性(P<0.01)。煮散中剂量组、煮散剂低剂量组与饮片汤剂组对小鼠足肿胀抑制率比较,差异均无统计学意义(P>0.05),与模型组比较差异有极显著性(P<0.01)。结论:本研究建立的麻黄汤主要有效成分含量测定方法,准确简单,重现性好。麻黄煮散制备工艺简单,可操作性好。确定了麻黄汤煮散的临床推荐使用剂量。初步动物药效学比较结果显示,煮散与饮片汤剂在解热,止咳,抗炎等作用方面差异不显著,而煮散的药材用量只是传统饮片汤剂的一半或更少。将煮散推广应用于临床,可以节约药材和成本,创造经济和社会效益。
