戊四氮致痫大鼠脑NPY、SS、5-HT和ATPase的变化及灵芝孢子的干预

目的:观察和探讨戊四氮致痫大鼠脑NPY、SS、5-HT和ATPase的变化及灵芝孢子的干预,进一步研究癫痫的发病机制及灵芝孢子粉的作用机制。方法:健康雄性Wistar大鼠30只,随机分为正常对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉治疗组,每组10只。模型组和治疗组用亚惊厥剂量的PTZ(35mg/kg)腹腔注射,每日1次,持续28天;正常组以等容生理盐水腹腔注射。治疗组同时经灌胃给予灵芝孢子粉(30g/L),灌胃体积10.0ml/kg;模型组和正常组以等容生理盐水灌胃。每天对每只大鼠在PTZ注射后进行观察并记录癫痫发作的级别、潜伏期及持续时间,凡出现连续5天Ⅱ级以上痫性发作为达到点燃标准。实验结束后断头处死动物,在低温条件下迅速取脑,采用放射免疫法检测大鼠大脑皮质、海马区和血浆中NPY的含量;免疫组化法检测皮质、海马区SS和海马区5-HT免疫反应性,利用化学比色法测定皮质和海马ATPase的含量.结果:治疗组和模型组实验动物全部达到点燃标准。皮质和海马区NPY含量模型组[(245.96±31.13)pg/ml、(270.02±29.32)pg/g]明显高于正常组[(185.47±16.28)pg/ml、(209.38±43.30)pg/ml](P<0.01),血浆中NPY含量模型组[(1037.89±122.73)pg/ml]明显高于正常组[(797.93±74,45)pg/ml](P<0.01);皮质和海马SS免疫反应阳性细胞数(×100)模型组[(10.25±2.05)个/高倍视野、(12.75±1.90)个/高倍视野]明显高于正常组[(2.34±0.74)个/高倍视野、(4.75±1.38)个/高倍视野] (P<0.01);海马区5-HT免疫反应阳性细胞数(×100)模型组[(5.87±1.35)个/高倍视野]明显低于正常组[(11.12±3.13)个/高倍视野] (P<0.01);皮质和海马区ATPase含量模型组均低于正常组,(P<0.01);皮质和海马区NPY的含量治疗组[(206.11±45.07)pg/ml、(230.88±28.46)pg/ml]低于模型组(P<0.05) ,血浆中NPY含量治疗组(907.49±79.39)pg/ml低于模型组(P<0.05);皮质和海马区SS治疗组[(6.37±0.91)个/高倍视野、(7.37±0.91)个/高倍视野]低于癫痫模型组,(P<0.01);海马区5-HT治疗组[(8.75±2.94)个/高倍视野]明显高于模型组[(5.87±1.35)个/高倍视野]( P<0.05);皮质和海马区ATPase含量治疗组均明显高于模型组(P<0.05)。结论:灵芝孢子粉能抑制大鼠癫痫发作,维持脑内微环境稳态,使脑和血浆中NPY的含量下调;并能有效降低SS过度表达对癫痫大鼠中枢神经系统的毒性损害,抑制神经系统免疫炎性反应,降低病变神经元兴奋性,起到抗癫痫作用;还能增加大鼠脑中ATPase的活力,增强5-HT免疫反应性,对神经细胞起保护作用。灵芝孢子粉作为一种治疗癫痫的辅助用药,在临床应用上具有广阔前景。