基于“肝脑相关”理论研究扶肝阳化痰开窍法对抑郁模型大鼠Wnt/β-catenin信号通路的影响

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作者
蒋洪
机构
[1] 福建中医药大学
关键词
抑郁症; 肝脑相关; 扶肝阳化痰开窍法; 柴桂温胆定志汤; Wnt/β-catenin;
D O I
暂无
年度学位
2018
学位类型
硕士
导师
摘要
研究目的:本研究以孤养结合慢性轻度不可预见性刺激模型大鼠为研究对象,从行为学及海马神经元形态学等指标变化阐释扶肝阳化痰开窍法对抑郁模型大鼠的疗效机制,通过RT-qPCR 检测 DVL-1、GSK-3β、Axin、APC、β-catenin mRNA 的表达量,探讨扶肝阳化痰开窍法的抗抑郁效果及其作用机制。研究方法:理论研究部分:基于“脑为元神之府”、“人之元气,根基于肾,而萌芽于肝”等理论,提出从肝脑相关为出发点治疗抑郁症,认为肝阳不足,升发无力,痰浊蒙窍,脑神失养为抑郁症主要病机,以扶肝阳化痰开窍法为基本法则,于柴桂温胆定志汤治疗抑郁症。实验研究部分:将60只雄性Wistar大鼠随机分成6组,分别为①空白组;②模型组;③柴桂温胆定志汤高剂量组;④柴桂温胆定志汤中剂量组;⑤柴桂温胆定志汤低剂量组;⑥氟西汀组。每组10只。通过孤养结合慢性轻度不可预见性刺激制备抑郁大鼠模型,于实验第1、21天观察大鼠一般情况、测量大鼠体重、进行敞箱实验(Open-field-test)以及蔗糖偏好实验。在实验第21天,行为观察结束后,采集大鼠海马标本,通过HE染色法观察大鼠海马形态结构变化及采用实时荧光定量PCR法检测大鼠海马组织DVL-1、GSK-3β、Axin、APC、β-catenin mRNA的表达量,以探索扶肝阳化痰开窍法对抑郁模型大鼠Wnt/β-catenin信号通路的影响。研究结果:1、通过孤养结合慢性轻度不可预见性刺激方法造模第21天后,空白组大鼠体重与模型组有显著差异(P<0.01),中药高剂量组、中药中剂量组与氟西汀组体重明显高于模型组(P<0.01),敞箱实验(Open-field-test)表明中药高剂量组与氟西汀组大鼠水平运动和垂直运动得分均明显高于模型组(P<O.01),蔗糖偏好实验提示中药高剂量组与氟西汀组大鼠糖水摄入量明显高于模型组(P<0.01)。2、HE染色法提示中药高剂量组与氟西汀组大鼠海马神经元细胞计数高于模型组(P<0.05)。3、RT-qPCR显示与空白组比较,模型组大鼠DVL-1mRNA表达量下降,GSK-3β、Axin、APCmRNA表达量上调,β-catenin mRNA表达量下降,而西药组及中药高剂量组均提示DVL-1mRNA表达量上升,GSK-3β、Axin、APCmRNA表达量下降,β-catenin mRNA表达量上升。研究结论:1、扶肝阳化痰开窍法对抑郁模型大鼠所出现的体重下降、活动力减退等行为有改善作用,对抑郁模型大鼠海马CA1区神经元细胞有一定保护作用。2、在应激状态下,大鼠Wnt/β-catenin信号通路被抑制,海马神经元细胞受损,而扶肝阳化痰开窍法能激活Wnt/β-catenin信号通路,促进海马神经元的发生,保护海马神经元细胞,发挥抗抑郁作用。
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