垂盆草对实验性结肠炎的保护作用及其机制研究

背景研究表明垂盆草对T细胞介导的免疫应答具有抑制功能。炎症性肠病(IBD)存在与T细胞有关的免疫反应过度亢进和难于自限炎症反应。FOXP3是一种转录因子,调控调节性T细胞的发生发育,具有免疫抑制功能。 目的(1)观察三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的结肠炎模型组、垂盆草干预组及对照组炎症活动指数(DAI)、大体形态损伤(CDME)、组织学改变(TDI)、FOXP3、转化生长因子β1(TGF-β1)、白介素2(IL-2)、白介素10(IL-10)的变化;(2)研究上述指标之间的关系,探讨结肠炎的发病机制;(3)探讨垂盆草对结肠炎是否具有保护作用及其可能作用机制。 方法30只清洁级SD大鼠采用随机数字法分为3组。模型组及干预组经肛灌入5%TNBS/乙醇(V/V为2 :1)5 ml/kg(TNBS实际用量为150mg/kg),对照组灌入0.85%氯化钠5 ml/kg,造模后第一天干预组给予垂盆草氯化钠溶液灌胃4.5g/(kg.d)10ml/kg,对照组及模型组给予0.85%氯化钠10ml/kg,观察炎症活动指数、大体形态损伤、组织学改变及免疫组化检测结肠FOXP3、TGF-β1的表达、ElISA法检测血清IL-2、IL-10浓度。 结果(1)模型组、干预组炎症活动指数(DAI)分别是2.74±1.25、1.76±1.28,**(干预组与模型组比较,以下同)P﹤0.05;大体形态损伤指数(CMDI)分别是2.30±0.82、1.70±0.48,** P﹤0.05;组织学损伤指数(TDI)分别是9.40±1.43、7.30±1.41,**P﹤0.05。 (2)对照组、模型组、干预组大鼠结肠黏膜组织POXP3阳性的细胞数分别是(6.920±1.8344)、(040±1.088)、(5.04±1.08),*(模型组与对照组比较,以下同)P﹤0.05,**(干预组与模型组比较,以下同)P﹤0.05,***(干预组与对照组比较,以下同)P>0.05;TGF-β1OD值分别是(0.231±0.034)、(0.186±0.013)、(0.211±0.023),*P﹤0.05,** P﹤0.05,*** P﹤0.05;血清IL-10浓度分别是(40.46±4.77) pg/ml、(27.61±4.28)pg/ml、(34.00±6.56)pg/ml,*P﹤0.05,** P>0.05,*** P﹤0.05;血清IL-2浓度分别是(50.39±3.92)pg/ml、(66.70±3.51)pg/ml、(61.39±4.44)pg/ml,*P﹤0.05,** P﹤0.05,*** P﹤0.05; (3)模型组FOXP3与IL-2呈负相关,r=-0.922,P<0.001;FOXP3与TGF-β1呈正相关,r=0.881,P=0.001;FOXP3与IL-10呈正相关,r=0.942,P<0.001;与CDMI呈负相关,r=-0.920,P<0.001;与TDI呈负相关,r=-0.875,P<0.001。 结论(1)模型组IL-2、DAI、CMDI、TDI升高;模型组FOXP3、TGF-β1、IL-10降低。(2)FOXP3与TGF-β1、IL-2、IL-10、CMDI、TDI相关,TNBS诱导的实验性结肠炎机制可能与FOXP3、TGF-β1、IL-2、IL-10相关。(3)垂盆草对TNBS诱导的实验性结肠炎具有保护作用,可能通过调控FOXP3的表达及影响TGF-β1、IL-2、IL-10等细胞因子的分泌而发挥作用。