大黄素对非酒精性脂肪肝大鼠内毒素性肝损伤的影响

目的：通过高脂饮食喂养大鼠8周后,腹腔注射小剂量内毒素,同时予大黄素进行干预,了解内毒素对非酒精性脂肪肝(nonalcholic fatty liver disease NAFLD)发展的影响,及大黄素可能的干预作用,为临床应用大黄素治疗NAFLD提供实验依据。 方法：42只雄性SD大鼠适应性喂养1周后随机分为正常组(A组)8只和高脂造模组(M组)34只,其中A组予普通饲料喂养,B组予高脂饲料喂养。喂养8周后,随机抽取M组2只大鼠,取其肝组织HE染色,证实有脂肪肝改变后,A组大鼠继续予普通饲料喂养；剩余的M组32只大鼠随机分为高脂组(B组)、高脂+NS组(C组)、高脂+LPS组(D组)和大黄干预组(E组)各8只,均继续予高脂饲料喂养,C组予腹腔注射NS,D组、E组予腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide LPS),剂量为20ug/100g隔日一次注射,E组予大黄素30mg/kg/d;持续2周,10周末称肝脏重量,计算肝指数,观察肝脏组织病理改变,计算肝脏脂肪变程度分级和肝脏炎症分级,检测血清丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase AST)、血清胆固醇(total cholesterol TC)、甘油三酯(total cholesterol TG)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein LDL)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein HDL)水平,肝匀浆测丙二醛(Malondialdehyde MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase SOD)水平,免疫组化检测肝组织肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor alpha TNF-a)核因子kB (Nuclear factor-KB NF-kB)的表达。 结果：实验10周末成功复制了大鼠NAFLD模型。1体重比较：B、C、D组大鼠体重较A组增加(p<0.05); B、C、D组之间体重差异无统计学意义(p>0.05)。2各项指标比较：B、C、D组肝指数、脂肪变程度、炎性程度、血清ALT、AST水平均较A组增高(p<0.05, p<0.01)；D组较C绀增高(p<0.01, p<0.05)；而E组较D组有所降低(p<0.01)。3血脂指标比较：B、C、D组大鼠血TC、TG、LDL显著高于A组(p<0.01) HDL低于A组(p<0.01)；D组血TC、TG、LDL较C组均明显升高(p<0.05,p<0.01) HDL明显降低(p<0.01)；E组血TC、TG、LDL较D组降低(p<0.05,p<0.01) HDL升高(p<0.01)。4、肝匀浆SOD MDA值比较：B、C、D组SOD水平较A组降低(p<0.05),MDA升高(p<0.01)；D组SOD水平较C组显著降低(p<0.01) MDA水平明显升高(p<0.01)；E组SOD水平较D组相比升高(p<0.01)MDA水平较D组相比升降低(p<0.01)。5免疫组化检测NF-κB及TNF-a比较：B、C、D组肝：NF-κB、TNF-a表达较A组增强(p<0.01,p<0.05)；D组较C组表达明显增强(p<0.05,p<0.01)；E组与D组相比表达减弱(p<0.01,p<0.05)。 结论：1内毒素通过诱导NAFLD肝脏组织TNF-a和脂质过氧化的产生,加剧NAFLD的肝损伤。 2大黄素可能通过抑制NF-κB活化,阻断内毒素损伤信号途径的传导,从而减缓NAFLD的病理进程。