栀子的指纹图谱与提取工艺研究

中药栀子是茜草科植物栀子的干燥成熟果实,含有环烯醚萜类（栀子苷类）黄酮类（栀子素灯）、有机酸酯类（绿原酸、藏红花酸类）等化学成分;具有对肝脏、脑组织、胰腺细胞保护作用,可以促进胆汁分泌、调节胃机能、增加内脏血流量、修复骨科软组织损伤心脏降压、解热、抗菌、抗炎等作用,具有广泛的药用价值。 本实验收集了10批栀子样品,确定了最佳提取工艺,采用高效液相色谱法,对药材和提取物的指纹图谱及相关性进行了研究,为科学评价药材和制剂质量提供了有意义的探索。 根据栀子含环烯醚萜类栀子苷、异栀子苷、京尼平龙胆二糖苷等水溶性成分,采用水、50%甲醇、甲醇作为提取溶剂制备供试品,经测试比较,色谱图基本无差异,水溶液较难滤过,50%甲醇毒性不大,故采用50%甲醇作为提取溶剂制备供试液,HPLC分析结果表明,该提取方法重现性良好。参照物选用结构明确的栀子苷,色谱柱选用Kromasil C18柱,检测波长为254nm,建立了真实反映栀子品质的HPLC指纹图谱。所建立的色谱图,化学指纹信息完整,色谱峰分离度好,特征明显。方法的精密度、稳定性和重复性符合指纹图谱研究的技术要求,可作为栀子药材的品质评价的质量控制的科学依据。 根据栀子的性质,其提取工艺设计为:水提取、醇沉淀、正丁醇提取。影响水提取工艺的主要因素为:加水量、药材浸泡时间、煎煮次数和煎煮时间,按4因素3水平L9（3～4）进行正交试验,确定栀子最佳提取工艺为栀子药材加10倍量的水,煎煮2次,每次2小时。经中试放大生产,此工艺设计合理,稳定可行。影响醇沉淀的主要因素为:浸膏浓度、浸膏温度、醇沉浓度和静置时间,按四因素三水平进行正交试验,等到一次醇沉条件为:煎煮液浓缩至每1ml含1.0g生药,浸膏冷却至室温（20～25℃）,加乙醇沉淀,使含醇量为75%,静置12h。经中试放大生产,此工艺条件可行。二次醇条件为:一次醇沉液浓缩至每1ml含2.0g生药,浸膏冷却至室温（20～25℃）,加乙醇沉淀,使含醇量为85%,静置12h。经中试放大生产,此工艺条件可行。影响正丁醇提取工艺的主要因素为:药液浓度（含生药量）、溶媒用量和提取次数,根据正交试验得到正丁醇最佳提取工艺条件为:药液浓缩至相当于每1ml含2.0g生药,用1.5倍量正丁醇提取4次。经中试放大生产,此工艺条件可行。 根据本文设计的提取工艺制备的10批提取物,经指纹图谱测定比较,证明此工艺条件稳定可行,重现性好,提取物的指纹图谱与药材的指纹图谱相关性良好,药材中主要特征峰均在提取物色谱图上得到体现。 本文建立的指纹图谱和提取工艺在实际大生产中均得到较好应用,特别是运用指纹图谱控制药材质量,跟踪生产过程,显著提高了制剂的质量。