肥大细胞抑制HDL3介导THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出的研究

目的 肥大细胞是一种参与炎症免疫应答反应的细胞。长期以来人们对肥大细胞的研究都侧重于过敏、皮炎、哮喘、关节炎等炎性及免疫性疾病。随着近年来人们对动脉粥样硬化的认识不断深入,从单纯的脂质学说到炎症学说,发现肥大细胞与动脉粥样硬化的发生发展密切相关。本研究以THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象,以药用水蛭源性类胰蛋白酶抑制剂为干预试剂,研究肥大细胞（肥大细胞颗粒释放液）对高密度脂蛋白3介导其胆固醇流出的影响,并初步探讨其作用机制。 方法 用Compound 48/80处理大鼠腹腔肥大细胞后,采用荧光分光光度仪检测组胺释放率,甲苯胺蓝染色观察肥大细胞脱颗粒状态。LDTI的提取采用丙酮抽提,反相高效液相纯化。酶法检测MCs颗粒释放液中类胰蛋白酶的活性。THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞在有或无HDL3、肥大细胞颗粒释放液、LDTI的培养基里共育20h,油红O染色检测泡沫细胞内脂质,高效液相色谱检测细胞内胆固醇和CE,液体闪烁计数器、荧光分光光度仪检测细胞内胆固醇的流出;RT-PCR检测THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1mRNA的转录水平。15%非还原聚丙烯酰胺凝胶电泳、琼脂糖凝胶电泳检测MCs颗粒释放液处理后的HDL3。 结果 肥大细胞被Compound 48/80处理后,甲苯胺蓝染色显示肥大细胞明显脱颗粒,组胺释放率为81.53±4.51%,表明肥大细胞脱颗粒度达到