鹿茸中活性多肽的研究

为了阐明鹿茸强筋健骨及抗肿瘤活性的作用机制，本研究运用 Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ　 Ｓ－２００ＨＲ 凝胶色谱、ＰＯＲＯＳ　２０ＱＥ 阴离子交换色谱、Ｃ１８ 反相色谱和 ＴＳＫ　Ｇ３０００　ＳＷ 高效液相色谱等分离手段，以相应的细胞活性为指标，从冷冻干燥鹿茸粉抽提液 中分离纯化得到三种具有生物活性的单一组分。分别是具有促大鼠成骨样细胞 （ＵＭＲ－１０６ 细胞）增殖和促胰岛素样生长因子 Ｉ（ＩＧＦ－Ｉ）分泌活性组分 Ｐｂ，经 ＳＤＳ－ＰＡＧＥ 和 ＰＡＧＥ 两类电泳鉴定为单一组分；对大鼠成骨样细胞（ＵＭＲ－１０６ 细胞） 有抑制活性组分 Ｃ１８－３；抗肝癌细胞（ＢＥＬ－７４０２ 细胞）活性组分 Ｃ１８－Ｃ。Ｃ１８ －３ 和 Ｃ１８－Ｃ 经毛细管液相色谱鉴定均为单一组分。　 纯化的 Ｐｂ 组分的分子量为　５６．３ｋＤａ，在蛋白浓度为 ０．１４９μｇ／ｍｌ 时，其促大 鼠成骨样细胞（ＵＭＲ－１０６ 细胞）增殖率为 ２４１．０３％，胰岛素样生长因子　Ｉ（ＩＧＦ － Ｉ ） 分 泌 量 为 ６６．８９ｎｇ／ｍｌ ； Ｎ － 末 端 氨 基 酸 序 列 为 ： ＤＨＫＳＥＩＡＨＲＦＫＤＬＧＥＤＮＦＱＧＬＶＬＩＡＦＳＱＹ。经序列分析比对发现，该组分为鹿血清白蛋 白。 纯化的 Ｃ１８－３ 组分对大鼠成骨样细胞（ＵＭＲ－１０６ 细胞）具有抑制活性，其最 低蛋白浓度为 ０．０１５８μｇ／ｍｌ，并随着浓度增加其抑制效果越显著，呈浓度依赖性 递次升高。表明鹿茸中存在对大鼠成骨样细胞（ＵＭＲ－１０６ 细胞）具有双向调节作 用的调控蛋白，为进一步研究鹿茸的强筋健骨机制和骨质疏松症防治提供了重要 线索。 纯化的 Ｃ１８－Ｃ 组分具有抗肝癌细胞（ＢＥＬ－７４０２ 细胞）活性，其最低蛋白浓 度为 ０．００１８５μｇ／ｍｌ，并随着浓度增加其抑制效果越显著，呈剂量的依赖关系， 为开发具有无毒副作用的抗肝癌药物研究提供了极为有益的线索。