红车轴草异黄酮提取及纯化方法的研究

本文以红车轴草为研究对象,首先对红车轴草中有效成分进行了初步分析;在此基础上,对比研究了4种方法提取红车轴草异黄酮的工艺条件;然后采用大孔树脂吸附法富集纯化红车轴草异黄酮;运用超临界CO2萃取技术对红车轴草异黄酮的提取工艺进行了初步的研究。 采用凯氏定氮法测定红车轴草中蛋白质含量为11.32%;采用苯酚-硫酸法测定红车轴草多糖含量为2.01%;采用超临界CO2萃取法测得红车轴草挥发油含量为1.04%。采用三波长紫外分光光度法测定红车轴草中总异黄酮含量为0.283%。 首次采用密闭体系微波提取装置对红车轴草异黄酮成分进行提取工艺的研究,通过单因素和正交试验对红车轴草异黄酮提取工艺中乙醇浓度、微波功率、料液比、提取时间和提取次数等影响异黄酮提取率的因素进行探讨。确定红车轴草异黄酮的最佳提取工艺参数为:乙醇浓度70%,微波功率高火（750w）,料液比1:15,提取时间1min,提取3次,异黄酮提取率可达到98.91%。并与回流提取、索氏提取、超声波提取法在工艺上进行了对比。 以红车轴草异黄酮为目标产物,考察了5种大孔树脂对异黄酮的吸附分离性能。通过静态吸附实验,筛选出D101树脂是纯化红车轴草异黄酮较为理想的吸附材料。采用D101树脂进行动态吸附实验,得出供试液浓度0.50 mg/mL,pH值4～5,上样量2倍柱体积（BV）,流速1.0 mL/min,以5 BV 60%乙醇洗脱,异黄酮解吸率71.5%,纯度26.7%;以5 BV 80%乙醇洗脱,异黄酮解吸率92.4%,纯度13.2%。并提出了富集纯化红车轴草异黄酮的新路线。 首次运用超临界CO2萃取技术对红车轴草异黄酮成分进行萃取。通过单因素试验对影响异黄酮提取率的工艺因素进行了探讨,得出最佳的超临界萃取工艺条件为:原料粒度40目,无水乙醇做夹带剂,相对于原料用量为1mL/g,萃取温度为40℃,压力25MPa,CO2流量6mL/min,静态萃取60min,动态萃取15min,异黄酮提取率为30%。对超临界萃取物中异黄酮成分进行了分析,提出了制备高纯度红车轴草异黄酮的新方法。